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楼主: fay898
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传代后细胞这样怎么办?   [复制链接]

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发表于 2013-2-16 17:54 |只看该作者
回复 jxydiandian 的帖子- E6 p* o. H0 s+ |

& K$ q5 N: h) O, G请问下传代后的接种密度多少啊?!

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发表于 2013-2-16 17:55 |只看该作者
回复 deshenglll 的帖子' ~0 f$ Z$ T; N; Y: i# x

( O  [, d+ H2 \7 e请教下传代后的接种密度多少啊?!

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发表于 2013-2-16 18:10 |只看该作者
细胞已经有些老化了,正常形态应该是细长梭形。这个做个成脂诱导吧,作为下一步写文章中得鉴定使用。
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发表于 2013-2-16 18:28 |只看该作者
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圆圆的飘起来的是不是死细胞,密度似乎小了点,下次传代换小孔板叫胞胞们密集点看看
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发表于 2013-2-17 09:16 |只看该作者
回复 fay898 的帖子* r9 ]6 H+ y9 H7 \  z& w

1 `) I- I7 \% W0 q1 X1*105/ml左右
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发表于 2013-2-17 11:00 |只看该作者
回复 fay898 的帖子/ h" z7 ~& Y9 E' [# T

, z- w# E6 }/ ~4 x( G) n" L我们养的是脐带间充质干细胞,原代培养7~9天就要换液重铺,当细胞贴壁率在80%以上时,才传第一代,一般就是3天左右吧!  你是用的什么培养基啊?
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发表于 2013-2-17 21:23 |只看该作者
回复 孙帅帅 的帖子; ], ~6 s8 F+ ]; p

/ s, `3 o/ H& S9 @4 E1 ?骨髓长的比较慢,原代培养15天左右才能传第一代~现在用维森特的低糖DMEM+10%南美FBS+1%双抗~
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发表于 2013-2-17 23:10 |只看该作者
你可以消化一下把消化的细胞再传代培养,用小点的培养皿试试。
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发表于 2013-2-18 02:03 |只看该作者
消化后的细胞传代接种细胞密度至少应在6~8x103/cm2,低于此接种密度细胞细胞不易长起来,尤其原代细胞收获的少,按此数不够一个10cm皿的接种数可将细胞接种于6cm的皿中,待4~5天细胞扩增的汇合了再按此密度往大皿里传,这几张图的细胞种的太稀,7天才长成这样,养十几天即使细胞长的汇合了,细胞的质量也不能保证。
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发表于 2013-2-18 10:20 |只看该作者
回复 老姜 的帖子' u0 M4 e  Q7 d+ w' s2 k
3 r* t& B, D+ n7 x% Z. D
恩,下次注意改进!谢谢您!
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