免疫荧光二抗用什么稀释？

细胞海洋

回复 请叫我晓白 的帖子- {/ Q$ t8 b! y+ W

' e- j! G& H2 f: [" q建议你发新帖提问

xiaoyurly

回复 请叫我晓白 的帖子5 e5 ]8 x+ g; ]$ W" s

5 R0 _$ e2 }0 V( I) x染冰冻的确实少，但是抗体说明书上明确表示可以用于冰冻切片染色，我们染不出来才换成石蜡，成功率才高了的。
( V+ Y/ J+ f7 S1 X1 s我们做的是心脏切片染色，心梗后5天的组织切片，还在炎症反应期间，所以c-kit阳性细胞较多，常规荧光显微镜拍摄。现在用共聚焦的挺多，照片清晰度更高。如果是正常心脏固有的c-kit阳性细胞应该是比较少，你是想染心肌干细胞吗？可能需要大量切片染色，然后耐心找视野
5 P! R6 K& l) L! u! Y1 ^, \4 Q$ o

请叫我晓白

xiaoyurly 发表于 2013-4-17 15:45 0 d& y! r% S  d; p: `0 R4 o  z# T- m
回复 请叫我晓白 的帖子6 S" j/ H( S+ Q8 z! ?$ d

: r3 G% U7 |" t) Q- v% Z染冰冻的确实少，但是抗体说明书上明确表示可以用于冰冻切片染色，我们染不出来才 ...

5 L$ T$ a' X6 B4 T  s$ e是的，是染梗死后固有的c-kit心肌干细胞，没有注射细胞，所以找不出来，根本达不到文献上那种效果。
" K6 x$ c  Y8 z; L. T真是郁闷。准备再做几次试试。有新问题的话还请您多多指教啊

xiaoyurly

回复 请叫我晓白 的帖子, [4 J% x6 c( B5 O# d

# B+ |  S; U$ z2 Y" }. g) v6 f没问题，祝好运

请叫我晓白

回复 xiaoyurly 的帖子$ a2 t* Y' m5 i" C* E/ |6 p

9 |3 R3 H+ W3 p5 F4 k" d
" c* ]. E  D3 W7 |# ^. s% E8 r8 k% C- X1 {
5 y5 n8 o, l- D2 c' P9 Y
老师，我又做了一次，请你帮我看看这张图是细胞吗

细胞海洋

回复 请叫我晓白 的帖子
; P9 E9 t- t+ G' q5 Y, }% N$ A7 ]" E7 g5 M
请直接上传论坛

jiaozi

我以前用的是PBS稀释的，不过效果也挺好，是否BSA关系不大

yangcy-smile

我们一般是用5%的血清进行封闭以及一抗和二抗的稀释，效果都挺好的。然后关于一抗稀释比例我们细胞的话用的最高的是1：400，二抗一般是1：1000.组织的话可能要酌情提高比例，但是我觉得要是染表面标记的话，二抗比例不宜很高。个人观点，不对之处，请各位指正。

xiaoyurly

回复 请叫我晓白 的帖子% K6 H4 d" z! W
2 |" L0 \( s' s7 L- H( T3 X& B
我看不到图片* |1 V! A2 O5 s( z! R' ~

请叫我晓白

回复 xiaoyurly 的帖子  |% R% c& M7 p. j9 o  n$ v3 u/ S

9 x+ z/ S2 N- Q1 {& z

2013-5-24 14:58 上传

下载附件 (148.49 KB)