Ficoll 分离脐血单核细胞

joe_binyang

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1年前也是这个牌子，后来因为太不好用，不是细胞污染就是回收率低，老板都让用进口的了，进口的是GE的

cloudy47

可以试着用DPBS等体积稀释下再铺到ficoll上，效果可能会好点。

Roden

都是新手啊，这个分单个核对离心机要求很高的。

细胞分裂

要看你是不是经常出现这种状况了，如果是偶尔出现，十有八九是和血液有关系，有些血才回来放了很久或者血液凝块太多，都会导致白细胞太少；如果经常出现，那就要考虑分离液的问题了，进口的东西不一定都好，另外还有离心参数，时间可以长一点或者短一点，自己试试看看。

lyj-0017

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一般都是要求室温吧，具体应该在22-25度之间吧，一般的分离液在4度的分离效果肯定不如室温好

zxmflying

monk125 发表于 2013-3-26 16:14 3 E9 `& d" z& r& ?2 L
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你是怎么离心的？是设置加速度为0的升降速度么？还有跟你血有关系，至少怎么也得5ml血 ...

' Q. \% |. X: C: m' B* d% L1 d1 J' X请问monk125兄具体怎么裂解红细胞、计数的？谢谢！

monk125

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用红细胞裂解液啊 1X红细胞裂解液 4度裂解4-5min就OK了 很好用的 但别时间太长 时间长 影响细胞活力

ywx6302706008

这个跟你血量有关，另外注意室温离心，血液要新鲜，分离液一定用进口的，不如GE healthcare的，离心的时候关掉刹车，最好用15ml离心管，不要用50ml的，50ml离心管会使白膜层的平面积太大容易晃动，也不好

ywx6302706008

天津灏洋的分离液不好用，ge healthcare的不错

ywx6302706008

分离液从冰箱拿出后要放一会，恢复至室温，在室温下离心，最好用进口的分离液，天津灏洋的不好，不过可以先用天津灏洋的羟乙基淀粉先把好细胞沉降后，再用进口分离液分离。