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回复 shagu 的帖子. v$ H* d( F, V& F ~
; g) }8 y$ O3 F/ G( t9 _7 O我大概是2×10^5/孔密度接种于6孔培养板,约80%融合时开始诱导,成脂的时候可以明显看到很多圆圆的脂滴,成骨的话感觉是细胞上沉积了一些钙盐,但不是很明显。如果你的细胞活力还可以的话,建议可以多诱导几天,这样染色图片更漂亮。成骨我是直接用的茜素红染色的,成脂用的油红O染色的。' @+ ~: b- U# q$ H! K% V
另外PBS我实验室用的是配好的呈瓶的,自己没有配。1 V# d2 R: j: q" z* W! G3 J
我当时预实验是成骨、呈脂分别诱导了三个皿,这样便于观察,可以不同的诱导时间染色,不然染色失败的话,时间等的太久。结果染色图片还是蛮漂亮的。
}9 u V0 S: ^4 M$ P6 h% C2 v不知道你的间充质干细胞有没有做过鉴定呢?我的做了流式细胞仪细胞表面抗原鉴定。
1 \. d7 e% T4 n3 N" n+ N" g3 q建议你的呈脂诱导时间长一些,10d不够吧。9 P+ q" p( ^2 M# [# @: G8 C
以上仅是参考,不知你诱导液成分。 |
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