脐带间充质干细胞培养问题

a565170383

胰酶0.125%培养瓶内消化2分钟OK

xiangxu

消化不完全，物理吹打的结果！" u6 }; f7 u5 x/ V
用0.25%的胰酶（加EDTA）消化,10分钟以内即可。

风信子deon

刚刚入门，学习下

cjq12862

考虑两点：3 T& N! Y$ G$ W( C
1、是否细胞培养时间过长；
6 }% ~7 A: D2 W/ n* n2、是否存在污染。

小样

细胞消化食呈片脱落，可同一代次为什么也会出现？有的呈片有的呈沙状脱落呢？求高人指点。有人说因为细胞密度过大，有人说消化时间长，到底是什么原因呢？？？

细胞海洋

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- I) r+ J+ r: C% b4 Y0 u; v' z建议你发新帖提问

小样

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; `2 S$ |! w& V
$ n1 z/ l! ^8 d# Z恩恩，谢谢

309208770

回复 shuimochunlan 的帖子. ]5 }8 i# Q0 v* \1 \8 |
: Z' _& y$ L4 u4 V8 ^
细胞长成膜状，是长得太满，消化时不容易成单个细胞消化，培养传代时这样的细胞不容易贴壁

维维睡啦

原因：你的细胞长过了，没有及时对细胞进行处理造成的。细胞融合率高，细胞排列过于紧密，细胞与细胞之间粘连结实。消化时，细胞成块脱落，粘在一起形成膜状，消化的时间再长也是没用的，反而会伤害细胞。不过这种现象可以继续传代，传代比例可以稍微加大。! [- w) O9 o- ^$ @* O
解决方法- ?3 A( L# A! O) Q- D9 `
1、以后培养时，细胞融合率达到80%左右即传代。
7 ~" h$ W( \/ l" Y# n2、加大传代比例。( B0 f7 O6 w/ C' w& B2 j
3、适当减短细胞培养周期。, `0 }$ n0 l( ]* W$ U7 D2 A; w
4、养成经常观察细胞长势的良好习惯，及时对细胞进行处理。

neng172

1、细胞长的太满的，下次长满80%左右就要传达了6 ?) h; j) r% U; g
2、或者改用0.25%的胰酶消化