脐带间充质干细胞培养问题

a565170383

胰酶0.125%培养瓶内消化2分钟OK

xiangxu

消化不完全，物理吹打的结果！
9 T7 H4 L3 i' t6 P用0.25%的胰酶（加EDTA）消化,10分钟以内即可。

风信子deon

刚刚入门，学习下

cjq12862

考虑两点：
( z  C4 b% G" N. a! f1、是否细胞培养时间过长；2 F0 i7 ?6 e  N- ?  [* Y/ }
2、是否存在污染。

小样

细胞消化食呈片脱落，可同一代次为什么也会出现？有的呈片有的呈沙状脱落呢？求高人指点。有人说因为细胞密度过大，有人说消化时间长，到底是什么原因呢？？？

细胞海洋

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# A0 k4 ?) ~$ k7 R
0 K# J: \( G/ h* N/ p建议你发新帖提问

小样

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. h% \" K4 @9 [. B$ @+ J" Z- C- x" p% q: e5 w2 `
恩恩，谢谢

309208770

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! A: Z" S4 |# ^/ }. W& N& h! M2 M: n( ?, T7 A" [- h
细胞长成膜状，是长得太满，消化时不容易成单个细胞消化，培养传代时这样的细胞不容易贴壁

维维睡啦

原因：你的细胞长过了，没有及时对细胞进行处理造成的。细胞融合率高，细胞排列过于紧密，细胞与细胞之间粘连结实。消化时，细胞成块脱落，粘在一起形成膜状，消化的时间再长也是没用的，反而会伤害细胞。不过这种现象可以继续传代，传代比例可以稍微加大。
4 T' [5 _" @; n解决方法( i/ W* K6 Q4 Z5 ]- A6 @1 w
1、以后培养时，细胞融合率达到80%左右即传代。
9 V! p+ n0 M5 P! ^$ r* p0 M2、加大传代比例。
( E, ?# y( g  [/ X+ c, u) p' t3、适当减短细胞培养周期。1 M3 _: o) t5 a4 ^7 u/ W
4、养成经常观察细胞长势的良好习惯，及时对细胞进行处理。

neng172

1、细胞长的太满的，下次长满80%左右就要传达了
/ \( ^- x. c6 A- m  c1 C7 Q& B) a4 S2、或者改用0.25%的胰酶消化