请问这是什么污染？如何挽救？

20111109

回复 lmh_yixue 的帖子" s% b" D7 @2 ^* q; h

* J4 U- G1 X; k" s! T8 k1 q嗯 伺候细胞这种事情都能游刃有余的话。。。以后伺候婆婆一定不在话下了~~

qiushuiwuhen

强烈建议废弃，我再4、5曾有两次污染，现在想想都是触目惊心，当时很可惜细胞，用还有高浓度的双抗去挽救，结果还是不行，并且恐怖的是可能会污染培养箱的其他细胞，所以建议你扔掉，全当是一次教训，再牛的人，谁不是从当年的污染走来的，加油

heming

应该不会是支原体污染，支原体污染在40X10的镜下是看不见的，必须做相关的检查才能知道。这个估计是什么杆菌污染，没得救了，重新找新的细胞吧。

deshenglll

像杆菌啊。这么多，估计细胞没啥用了。之前我们也尝试过补救，可以是到冻存的时候就污染了。从新做吧，前期的消毒处理很重要。祝你好运。

bioaizhiying

lmh_yixue 发表于 2013-7-30 13:21 - b% ?: @. i& O. I
请问这是什么污染？怎么挽救细胞？是支原体吗？用什么可以杀死而不影响细胞

6 V* i4 D% G, _. K+ q+ r$ D
可以肯定的说不是支原体污染。这种污染我遇到过，和你描述一致。曾用pbs双抗洗过4遍后换液，并加2倍双抗接着培养过，不过仍抑制不了其增殖。+ i1 Y$ c. [' c3 V$ N- k3 o; l
感觉像“虫子”，你这种情况，40倍估计可以看见培养液表面密密麻麻漂着这种“虫子”。2 Q$ Q/ ]7 y# v4 q  ~0 J8 `+ q
试过加1倍培养液体积的75%乙醇可以很快挂掉这些“虫子”，但仍挽救不了。索性见到这种情况直接扔掉。
7 w( j! q  ?' s( V  C2 |个人感觉细胞传代过多或者培养条件变化，发生这种污染的概率比较大。

lmh_yixue

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6 D$ q4 V8 F& F7 [) ?5 \0 F, i" |
谢谢！！！

lmh_yixue

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* P# h+ N$ ~: v' E5 g2 f& c  {) m7 u% _
谢谢！！！

lmh_yixue

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! \. U0 C  h4 I0 C- u8 }
谢谢！！！

lmh_yixue

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谢谢！！* E7 _+ }9 e/ k3 u7 R
这些虫子看着很可怕，但是细胞怎么还一直活着，状态也不错。我把外面没有消毒的离心管放入生理盐水后再将生理盐水培养，今天看到生理盐水里也有这个虫子。我想可能就是消毒问题了，活着操作过程中碰到了外界物。
6 a  `& i. e, Y# z/ Z, M我们做诱导实验，这细胞在外面养了10天没传代，好不容易诱导出来了却污染了。

zpzp0312

你用PBS彻底清洗培养物若干次，一定要洗的自认为很干净，然后消化成单细胞。随后拿一个96孔板加满培养基。将单细胞悬液吸取少量放在第一个孔里，混匀。再从第一个孔吸取少量转移进入第二个孔，依次稀释。) O9 D& j; s4 ~, R- p# f( g& y  ?- ]
最后，你可能会获得无污染的细胞培养物。
5 a5 Y6 f' k/ m9 C0 D另一个方法就是将细胞消化后，稀释到较低的细胞密度，使用显微操作仪收集单细胞并转移进入新的培养皿。一定要在最高倍数进行操作。拉针要尽可能长，前端过度要缓，尽量多吸取单细胞并避免吸入细菌。