谁有悬浮细胞球培养经验

Leipzig

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8 W! R5 F4 x! r* P( n, e非常感谢，我以前没养过悬浮细胞，刚开始，发现很多问题，上次本来长的很好，我换了次营养液，只换一半，后来发现一些碎的死细胞，不知道是球太大老化了，还是不适应新溶液，还是我操作过猛。" ^/ l! p9 E0 q) n8 e9 E7 v6 w; N
有的细胞球很大，有的很小，很难判断是否要传代，以大球为准吗？
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如果部分细胞出现贴壁应该怎么办呢？

Leipzig

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非常感谢，我以前没养过悬浮细胞，刚开始，发现很多问题，上次本来长的很好，我换了次营养液，只换一半，后来发现一些碎的死细胞，不知道是球太大老化了，还是不适应新溶液，还是我操作过猛。
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有时细胞会自己聚集在一个区域内，很密集，其他地方几乎没有细胞，这样是常见现象吗？
; ?. t% @- E3 W) ]( a7 u/ E% ?如果部分细胞出现贴壁应该怎么办呢？

fengjh100

不好意思，近期由于实验繁忙，没有及时到这里回复，见谅！& z5 `2 w2 J4 Z, u! K2 j$ u2 J% |
出现贴壁的情况还是比较常见的，一般是饲养环境所致，部分是饲养时间过久，细胞老化所致。解决办法有：1是用3D培养，其实可以简略些，用琼脂糖铺底板，这个经验坛子里说明的已经很多很常见了；2是加入一些抑制分化的因子，如白血病抑制因子等。传代的判断不好界定，靠经验吧，摇动后发现絮状沉淀比较多的情况下，需要及时传代了。建议细胞成熟后及时使用，尽量不要传代，因为可能出现变异。且状态不良。每天都尽量摇动悬浮的细胞，可以避免出现不均的情况，也可促进其球体形成。. _3 s& d2 d" y5 k9 m/ M% q, x1 M

lily132

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" Q" r' D% S2 N+ C2 F1 y- k6 o- w2 w/ y( U
你好fengjh100,
6 c/ g# m. T! T; U请问你是如何消化细胞球的呢？用什么消化酶，多长时间？你做过U251细胞没呢？