谁有悬浮细胞球培养经验

Leipzig

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非常感谢，我以前没养过悬浮细胞，刚开始，发现很多问题，上次本来长的很好，我换了次营养液，只换一半，后来发现一些碎的死细胞，不知道是球太大老化了，还是不适应新溶液，还是我操作过猛。, ^4 l+ ^) T- E2 V
有的细胞球很大，有的很小，很难判断是否要传代，以大球为准吗？' E/ X0 a; n5 [6 i% E
有时细胞会自己聚集在一个区域内，很密集，其他地方几乎没有细胞，这样是常见现象吗？: K9 f) ?% F  T0 X' z, J  M" I/ s
如果部分细胞出现贴壁应该怎么办呢？

Leipzig

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5 L6 l' V6 Q% U- }+ h( e! g0 w3 @# M非常感谢，我以前没养过悬浮细胞，刚开始，发现很多问题，上次本来长的很好，我换了次营养液，只换一半，后来发现一些碎的死细胞，不知道是球太大老化了，还是不适应新溶液，还是我操作过猛。/ [2 ], v' u# I; W: E& j4 h
有的细胞球很大，有的很小，很难判断是否要传代，以大球为准吗？
  }$ a- t1 G' V有时细胞会自己聚集在一个区域内，很密集，其他地方几乎没有细胞，这样是常见现象吗？( t3 \+ n, k- a; b2 z# L4 |0 m( l
如果部分细胞出现贴壁应该怎么办呢？

fengjh100

不好意思，近期由于实验繁忙，没有及时到这里回复，见谅！: ?& l- r- i/ k# H3 v# u% f
出现贴壁的情况还是比较常见的，一般是饲养环境所致，部分是饲养时间过久，细胞老化所致。解决办法有：1是用3D培养，其实可以简略些，用琼脂糖铺底板，这个经验坛子里说明的已经很多很常见了；2是加入一些抑制分化的因子，如白血病抑制因子等。传代的判断不好界定，靠经验吧，摇动后发现絮状沉淀比较多的情况下，需要及时传代了。建议细胞成熟后及时使用，尽量不要传代，因为可能出现变异。且状态不良。每天都尽量摇动悬浮的细胞，可以避免出现不均的情况，也可促进其球体形成。5 L% G! C! N; _! H3 w

lily132

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你好fengjh100,9 E+ F" S4 j" Y- C" ^; R* ~
请问你是如何消化细胞球的呢？用什么消化酶，多长时间？你做过U251细胞没呢？