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楼主: xuyang0317
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请教脂肪间充质干细胞的培养基问题   [复制链接]

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发表于 2013-8-26 08:58 |只看该作者
回复 xuyang0317 的帖子6 y/ ?: z. }4 m, n( f
3 U+ G8 T  V; ]/ W* A
你好,是否加双抗对于间充质干细胞的生长是不影响的
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发表于 2013-8-26 10:43 |只看该作者
如果只是单纯的科研实验性质,可以加双抗。如果以后做人用途的,还是不要加,注意整个实验过程的无菌操作。
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发表于 2013-8-26 11:55 |只看该作者
回复 xuyang0317 的帖子9 O9 y' j) l- l7 ~) Q
1 P5 X0 h* C6 `# ?  M: g
1、脂肪干细胞胶原酶是I型,质量浓度0.1%,37度震荡消化30min-1h,一定不要超过1h。9 H3 w6 f0 P" ~1 z- E% I; i
2、双抗可加可不加,对细胞影响不大。初学细胞培养者建议添加,防止污染。
( c) ]$ @+ J2 |! f* W3、培养基可以选低糖,也可以先高糖,都可以的。加10%FBS,再加些细胞因子即可。
' x; ^, M, O0 o8 y: n  |8 J9 [2 I
总之,脂肪干细胞很容易培养。扩增很快,数量很多。
! @, {9 m2 U. E$ m. t祝你成功。
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发表于 2013-8-26 11:55 |只看该作者
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回复 xuyang0317 的帖子# @% ~4 H. A+ Y8 q
+ m$ i1 V% M3 i' w7 Y, Q
都是正常现象。

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发表于 2013-8-26 15:22 |只看该作者
回复 小公 的帖子
* j4 c3 P& x- ~/ E: W+ E2 M/ \7 n6 E; F' T6 d
我的培养基没有加双抗,实验室很洁净
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发表于 2013-8-26 15:25 |只看该作者
回复 wf78365421 的帖子0 |2 ]& p% N- W1 [8 U" ^
. J: E4 [8 [3 Q5 _
恩,谢谢您了,我记下了你说的,酶解不超过1小时!酶的话我暂时只有II型胶原酶,以后看能换不,谢谢您了,培养基看条件,允许的情况下考虑下用低糖的
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发表于 2013-8-26 16:07 |只看该作者
回复 xuyang0317 的帖子
- Q0 x% V" _8 p2 a5 \
8 w8 a: A* r- [+ o一般半小时就可以。
# \& P: R2 t, p# {* V! g脂肪块变成糜状了就可以。
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发表于 2013-8-26 22:27 |只看该作者
回复 wf78365421 的帖子! u) q  |; h# e) n
+ n7 J: r( @) D3 Y: S
我现在做的脂肪样本基本没有组织,是呈“果粒橙”那样的东西,也不知道是怎么提取的脂肪,现在酶解的时间也是40min
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发表于 2013-8-28 15:45 |只看该作者
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! ^( b: Z/ ~* r( K! m) u$ M) Y, E6 C
3 l1 D# K7 E# ^+ f$ b是的。吸脂出来的脂肪就是那个样子。黄黄的。
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发表于 2013-8-29 16:39 |只看该作者
回复 wf78365421 的帖子& `( ^) E$ R$ Q8 q8 v/ P

6 G( R0 d  g6 ^% a( G0 Z1 Z我做的脂肪已经传代了,可惜没拍照片,有机会拍你瞧瞧,不过传代的形态个人感觉不怎么好,感觉一般,好像是快要分化的,贴壁也很快,1小时就贴壁了,按照以前的经验,3d后,就会传P2了,到时弄点流式照片你帮我参考下,谢谢您啦!
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