请教脂肪间充质干细胞的培养基问题

小公

回复 xuyang0317 的帖子+ p3 ~& B' w! j) j2 \

) a! P  R+ Y" ^) S% X# p你好，是否加双抗对于间充质干细胞的生长是不影响的

shunanqi

如果只是单纯的科研实验性质，可以加双抗。如果以后做人用途的，还是不要加，注意整个实验过程的无菌操作。

wf78365421

回复 xuyang0317 的帖子8 O2 p' G9 J- t6 l% x. {" q

, V9 G0 p0 E9 L* H1 a# {% W1、脂肪干细胞胶原酶是I型，质量浓度0.1%，37度震荡消化30min-1h，一定不要超过1h。
' c3 N& q$ ?' a4 x, I+ ?( M/ c- c2、双抗可加可不加，对细胞影响不大。初学细胞培养者建议添加，防止污染。
+ x( \  ?# q; K; K9 v3、培养基可以选低糖，也可以先高糖，都可以的。加10%FBS，再加些细胞因子即可。
7 W7 z1 p) l' y! j1 L  h- t+ }1 i0 Y, }+ R5 T& a" B
总之，脂肪干细胞很容易培养。扩增很快，数量很多。
, b+ t/ O3 g- m* D* q祝你成功。

wf78365421

回复 xuyang0317 的帖子# d! ~. J+ h6 |- d

2 q5 @! ]/ W+ d+ n& g7 i  }都是正常现象。

xuyang0317

回复 小公 的帖子$ V" T) y' d  w" I& D$ S$ t$ j& U

# Y) s  h+ A& H% m* E我的培养基没有加双抗，实验室很洁净

xuyang0317

回复 wf78365421 的帖子; T1 w) G/ e0 f( {

' {9 n8 _9 P* }4 t3 r6 p3 g, I) d恩，谢谢您了，我记下了你说的，酶解不超过1小时！酶的话我暂时只有II型胶原酶，以后看能换不，谢谢您了，培养基看条件，允许的情况下考虑下用低糖的

wf78365421

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" M7 j: I4 f$ G; P: N
" p0 x, m+ T' V7 a/ k4 i/ f, A' `一般半小时就可以。9 ?  B* o7 N8 e6 u2 @* N; a2 r2 @) T
脂肪块变成糜状了就可以。

xuyang0317

回复 wf78365421 的帖子% d  F* w! O# A7 Y
( s  @4 {, A$ z5 @# `! a, J$ U* ~
我现在做的脂肪样本基本没有组织，是呈“果粒橙”那样的东西，也不知道是怎么提取的脂肪，现在酶解的时间也是40min

wf78365421

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* F1 B* \6 H1 k) I. w9 b
1 Q- D% |  n1 Z  p是的。吸脂出来的脂肪就是那个样子。黄黄的。

xuyang0317

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: f4 n" N: d# x1 R! R' M
+ Q& V; y' _" n' ~3 L我做的脂肪已经传代了，可惜没拍照片，有机会拍你瞧瞧，不过传代的形态个人感觉不怎么好，感觉一般，好像是快要分化的，贴壁也很快，1小时就贴壁了，按照以前的经验，3d后，就会传P2了，到时弄点流式照片你帮我参考下，谢谢您啦！