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楼主: xuyang0317
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请教脂肪间充质干细胞的培养基问题   [复制链接]

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发表于 2013-8-26 08:58 |只看该作者
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: [) ?' L' n/ h1 Q+ V* e; g) }4 y, I$ d
你好,是否加双抗对于间充质干细胞的生长是不影响的
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发表于 2013-8-26 10:43 |只看该作者
如果只是单纯的科研实验性质,可以加双抗。如果以后做人用途的,还是不要加,注意整个实验过程的无菌操作。
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发表于 2013-8-26 11:55 |只看该作者
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  X6 {* P, \6 v2 c
/ U) a# L0 q# ]9 a" ~/ G/ @1、脂肪干细胞胶原酶是I型,质量浓度0.1%,37度震荡消化30min-1h,一定不要超过1h。2 ?  b6 n* g1 i  N
2、双抗可加可不加,对细胞影响不大。初学细胞培养者建议添加,防止污染。
/ @; J5 Q( K8 |3 m* E3、培养基可以选低糖,也可以先高糖,都可以的。加10%FBS,再加些细胞因子即可。
: n3 [% M* I  ~8 o. h* w# V. w+ y
, N& q( P- r- r8 g+ }总之,脂肪干细胞很容易培养。扩增很快,数量很多。
) U* R: k6 L+ K) M祝你成功。
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发表于 2013-8-26 11:55 |只看该作者
回复 xuyang0317 的帖子. M+ e& x; H1 p& t

# f8 r& t+ ?7 [  J5 |都是正常现象。

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发表于 2013-8-26 15:22 |只看该作者
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+ S% K' X; K9 ]7 t: A. `
& U# |( {  X( D我的培养基没有加双抗,实验室很洁净
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发表于 2013-8-26 15:25 |只看该作者
回复 wf78365421 的帖子
; h: e/ K% l8 N8 o7 y  Z, B- F# U. b9 r' x& ^0 d
恩,谢谢您了,我记下了你说的,酶解不超过1小时!酶的话我暂时只有II型胶原酶,以后看能换不,谢谢您了,培养基看条件,允许的情况下考虑下用低糖的
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发表于 2013-8-26 16:07 |只看该作者
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& |" A/ E& C! u% K: `% t7 g
$ ~& o+ X! W* y, y( \0 d0 z一般半小时就可以。  y. Y3 j& \" M( p: U  E
脂肪块变成糜状了就可以。
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发表于 2013-8-26 22:27 |只看该作者
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: U# w. {6 I8 e% U. E2 c4 V$ F9 ~3 b; r* x; x
我现在做的脂肪样本基本没有组织,是呈“果粒橙”那样的东西,也不知道是怎么提取的脂肪,现在酶解的时间也是40min
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发表于 2013-8-28 15:45 |只看该作者
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- {/ R/ `, e( o* Y! Y0 X! @  N9 F: O9 p& }: C( ]  l0 w+ z5 g  }
是的。吸脂出来的脂肪就是那个样子。黄黄的。
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发表于 2013-8-29 16:39 |只看该作者
回复 wf78365421 的帖子! a3 P. p9 R/ q

$ T  _& ~% s! Y  c2 l我做的脂肪已经传代了,可惜没拍照片,有机会拍你瞧瞧,不过传代的形态个人感觉不怎么好,感觉一般,好像是快要分化的,贴壁也很快,1小时就贴壁了,按照以前的经验,3d后,就会传P2了,到时弄点流式照片你帮我参考下,谢谢您啦!
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