悬浮细胞球的免疫染色方法

yuanshenyewu

我也养这种球，很是郁闷，免疫荧光效果不是很好，散光一片。免疫组化的话，那么小个球能切么？

yuanshenyewu

我养的球才100微米，肉眼刚可以看到，楼主养的球多大啊？) U6 H; N, |( B: M2 _: D

changbaihou

回复 yuanshenyewu 的帖子: e3 F! t* a! d' p% U5 o0 j9 p; g9 a
/ ?* C, Q; k; t! N% h
我养的第三天开始成球，很快超过200um，然后就开始互相融合、中间开始坏死。

yuanshenyewu

中间坏死是怎么看出来的呢？被包在里边，我原来一直以为是保护里边的重要细胞呢

changbaihou

回复 yuanshenyewu 的帖子
. e$ H, x: Y& U9 r9 V  n! ~6 _2 u. z+ {* e) m
中间的细胞由于团块过大，失去营养而坏死发黑，失去正常的结构和折光性。

bin

回复 changbaihou 的帖子8 m# D+ e7 w1 U. `  b" C+ I
  S2 b2 D( f; j) b( {/ S  h
我不知道你说的细胞贴壁是指什么，细胞球可以贴在玻璃片上，如果时间太久球中的细胞就会趴下来，但是时间不够的话在染色的过程中细胞球很容易掉，所以贴壁时间是非常关键的，我以前做的时候是不加血清，贴1-2个小时细胞球就可以贴好，但是有些细胞已经开始爬下来了，你可以在一个玻璃片上贴很多球，最后拍照片的时候拍好看的就可以了。- `; }7 i% G" V7 y

changbaihou

回复 bin 的帖子
+ c3 R' L& g, w6 `: q/ D+ N  B  `$ q
多谢，我是想让细胞球消失，细胞在片子上贴成一层。
. Q$ e8 h# R9 Z: v, d7 ^- N) z: R8 Z/ i, w0 u
看来不需要充分吹打细胞球，把他们分散成单个细胞，他们会离开细胞球，自己往片子上爬。

小渝

回复 changbaihou 的帖子3 N* i' s" m8 h+ I

& w+ w$ E6 v  {我试过，通过包被玻片然后是细胞球贴壁，关键是看什么细胞，我的是神经干细胞球，大概2h左右，如果太久细胞球就散开了，如果太段贴壁不牢固，在处理中很容易掉

wujian

做免疫荧光也是不错的选择吧

初来乍到者

回复 bin 的帖子! c, m. K0 j* @1 p; a& W* @
, w. M0 A2 D+ X
用PLL或Laminin的玻璃片是什么样玻璃片