亲们，我这个Western 的目的条带为什么出现了两条带？

微笑流滢

回复 lmchen 的帖子! p. m" w  h7 |
9 M# b4 E. j7 H( v% g( z
这个没有标签，我们一开始也觉得是下面的是本底表达，上面的是过表达的，可是他们的分子量差的有点远，是不是有修饰什么的？？？

微笑流滢

回复 helong 的帖子7 g2 i1 U* `! F% @1 t% S$ k: z

. M; _4 c& @9 V# `8 w是没有解释清楚

微笑流滢

回复 yueweilei 的帖子
( d+ p, q8 a5 @/ p2 W2 ?
. c7 f$ o9 k' v* k5 L& H是对照，没有转染过表达质粒，只是转染了一个普通的质粒

微笑流滢

回复 aulenuyah 的帖子
! e  i3 X* n6 @9 j- f3 e0 |7 t3 F
0 }; ^% w( m6 {7 V# F1 k& l8 }7 W在37 KD左右只有一条带，有的裂解物里有几条，不过都离得很远，而我这个两条带离得还可以，不像抗体说明书里那么远

yaner

下面的应该是杂带，抗体加大稀释度或者重复利用的话，下面的带就会消失了

微笑流滢

回复 yaner 的帖子0 s6 y' P, U) j0 b: Y, Z  Q
0 f+ N, X$ R  W& p
右边是对照，那条细的条带是这个蛋白应该所在的位置，所以现在是搞不清楚为什么过表达的（就是左边）上面多了一条带？而且和对照的不在一个地方？？？？

微笑流滢

回复 yaner 的帖子/ y2 i% B1 R& [0 {
! \2 ?  ^& Q6 @' b1 X' J
一个师姐说，可能有一些什么糖基化修饰啊，什么的，所以可能导致其不在一个地方

castlered

非特异吧

sc-cxw

两条带的离的很近的情况下  通常是蛋白发生了磷酸化或者乙酰化或者氧化之类的修饰，用软件预测一下是否有翻译后修饰位点。

cronos0910

Maybe that are isoform of your protein.