亲们，我这个Western 的目的条带为什么出现了两条带？

微笑流滢

回复 lmchen 的帖子
( P" x3 F9 W, A. G
6 J6 n! u" m, [+ j' y2 q这个没有标签，我们一开始也觉得是下面的是本底表达，上面的是过表达的，可是他们的分子量差的有点远，是不是有修饰什么的？？？

微笑流滢

回复 helong 的帖子
" Z3 d: Y$ I& }
8 e1 f; s3 t$ z# T% z$ x是没有解释清楚

微笑流滢

回复 yueweilei 的帖子. d5 I. {# `3 ]9 f$ u$ H: E% `( y
0 N# m6 _) O" v5 _1 P9 y
是对照，没有转染过表达质粒，只是转染了一个普通的质粒

微笑流滢

回复 aulenuyah 的帖子- X# D6 X0 U  n6 |+ O# a

2 Q( G  i7 C3 w1 ]在37 KD左右只有一条带，有的裂解物里有几条，不过都离得很远，而我这个两条带离得还可以，不像抗体说明书里那么远

yaner

下面的应该是杂带，抗体加大稀释度或者重复利用的话，下面的带就会消失了

微笑流滢

回复 yaner 的帖子- X* |9 S% \4 a) B

0 q  y1 F/ L2 a2 k  R2 A右边是对照，那条细的条带是这个蛋白应该所在的位置，所以现在是搞不清楚为什么过表达的（就是左边）上面多了一条带？而且和对照的不在一个地方？？？？

微笑流滢

回复 yaner 的帖子/ F" `+ e2 W% l- z. @* c. p! U& G

) O8 j* j7 B; H5 ]4 \1 D( v一个师姐说，可能有一些什么糖基化修饰啊，什么的，所以可能导致其不在一个地方

castlered

非特异吧

sc-cxw

两条带的离的很近的情况下  通常是蛋白发生了磷酸化或者乙酰化或者氧化之类的修饰，用软件预测一下是否有翻译后修饰位点。

cronos0910

Maybe that are isoform of your protein.