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楼主: 大海之家
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包被方法诱导NK细胞的可能性!!! [复制链接]

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11楼
发表于 2014-4-1 09:33 |只看该作者
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回复 zhenhuale 的帖子8 }; Y) n" w7 j5 F. e) {
. V' z- B+ s5 M8 Q
请问你们NK细胞培养是使用NK细胞培养基还是淋巴细胞培养基的?是包被诱导还是悬浮诱导?
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12楼
发表于 2014-4-1 10:36 |只看该作者
回复 zhenhuale 的帖子+ V0 `, m' u! {
2 t" Y8 \1 I+ r5 W8 y
50ml血扩增20亿个细胞单细胞量确实不怎么多,但是你的纯度可真是高啊,是CD3-/CD16+/CD56+细胞达90%,还是只是CD3-/CD56+细胞达到90%呢?想问下你这个这么高的纯度是怎么做到的?还有就是你的细胞因子是不是用的有点多呢,我们只用三种细胞因子细胞量就能达到60个细胞,但是纯度相对很低,CD3-/CD16+/CD56+只有30%,培养瓶没有包被。. s5 W2 T6 K2 x! T
再问下,你用的是什么NK细胞专用培养基?
0 y* C: t8 D% K2 ~8 C0 R
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13楼
发表于 2014-4-1 10:57 |只看该作者
回复 zhenhuale 的帖子9 s/ u7 {; f/ U3 ]9 z# U; ?; e
7 m! B6 }2 R  X5 c+ H/ W! D
50ml细胞量扩增20亿个细胞,就细胞量上来说不是太多,但是90%的纯度确实很高,你是怎么做到的,免疫磁珠分选了吗?我用50ml血可以扩增细胞量达到60亿个左右,但是纯度很低,CD3-/CD16+/CD56+细胞只有30%,对于你的90%我很好奇?还有就是你说你用的专门的NK细胞培养基,请问是什么培养基?
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14楼
发表于 2014-4-1 11:03 |只看该作者
回复 weijunning 的帖子0 t2 |4 k( E- {) {
4 G0 P. S( }& H/ J; @$ B
什么培养基,有没有跟其他的淋巴细胞培养基做下对比,到底有多大的提升空间?我们做的没有进行培养基包被,因为是做临床治疗的,为了安全起见,虽然细胞量还可以,但是纯度较低,因此我非常想知道包被之后的NK细胞量和纯度上,在同样的培养体系下,和未包被的到底有多大的差别?所以想问问你,能不能给个具体的数据支持呢?
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15楼
发表于 2014-7-2 02:11 |只看该作者
包被的方法挺实用的,可以选择包被,血清用自体的,一般1%,看细胞状态适量调整。培养基干细胞的就行。
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16楼
发表于 2014-8-19 17:14 |只看该作者
回复 weijunning 的帖子/ F( `' K* P1 f6 u  X
+ ^8 {. X2 q1 t
把因子直接包被到培养瓶上吗,如何包被呢

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17楼
发表于 2014-8-19 17:15 |只看该作者
回复 大海之家 的帖子8 v; |; ^% z4 ]8 ^

" i. P( e# a3 L6 @* r1 h文献上有将这些因子通过转基因的方法表达与滋养细胞表面,然后与单个核共培养
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18楼
发表于 2014-8-19 17:16 |只看该作者
回复 zhenhuale 的帖子( ^* c3 N' Q. m) @

0 i' t3 \9 L' ]; L4 v你好能分享一下NK 的培养流程吗

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19楼
发表于 2014-8-19 17:17 |只看该作者
回复 weijunning 的帖子7 B: w: A8 c1 N+ f. R
* K. _, Y9 K; v' v. j
普通的培养基就可以了
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20楼
发表于 2014-8-26 13:18 |只看该作者
今天看到一个专利上写用CD3和CD52包被,再用IL2刺激。仅供参考
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