胚胎干细胞向心肌细胞方向诱导

智露

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我们是用中皿悬滴的，你用96孔板是悬浮培养 吗？你怎么悬滴的？

shaozi402

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9 A, R8 s9 {$ v  b/ i
96孔板里的是悬浮培养，每个孔可以形成一个悬浮球，3月5号做了一批，还可以，挺圆的，就是还没有分化到我要的结构
7 C. B: X# I3 |0 Y9 G( d. G悬滴是在培养皿里面做的，将有细胞的液滴滴在lid上，然后盖在装有PBS的皿上，据说24-48h就可形成EB，我3月17号悬滴做了一批，今天白天观察发现细胞聚集在一起，但细胞团容易散开。今天又做了一批，有待观察

智露

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$ s# @0 ?* E$ t6 v7 q# t, W
# Y) I. a4 V# i6 k容易散开？是不是边缘分化了啊？你的那Vxing96孔板是做过特殊处理的吗？还是本身就能使EB悬浮啊？我在文献中也看到用96孔板的，我们用的是超低皿，底部是做过特殊处理的，所以能悬浮EB。你们悬浮几天？悬滴时一滴多少微升多少个细胞？

shaozi402

用悬滴法做的细胞团块，我将盖子翻转，在显微镜下观察的时候，可以动态看到部分细胞散开，我怀疑是时间不够长，于是就多观察几天，未进行其他处理，具体悬浮几天，文章中有说24～48h.
) O8 w  J& A4 i. z8 @% ^1 u  a3 _% Z悬滴法第一批…20ul/drop,1000个细胞，5 l, s4 ?- g3 X5 n$ r; s5 C1 [
悬滴法第二批…30ul/drop,3000个细胞& N3 E* P! h" {- H
96孔板形成的EB,96孔板是低黏附的。
8 o1 d% H( A7 w, I9 V+ C你用的那个皿是哪个公司的，多大的，细菌培养皿可以替代吗？

智露

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0 \8 _/ i) A$ b' c* ~, z5 g" d, Q+ W8 @7 R( B, Y" Z/ s9 u
是corning的，大皿，，，，，和大皿外形一样只不过它是ultra-low，你一查就能查到。你的96孔板是V型底的，平底就不可以了吧？你悬滴也是用普通皿的盖子做的吧？你是20ul，1000个细胞啊，我是20ul，500个细胞。你那么多细胞形成的EB肯定大把？我是悬浮5天，你悬浮几天啊？

智露

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: j% R& X$ g" @7 T3 ~0 w
$ `* _9 ]$ m, j  L% |亲，你在不在啦？好想和你讨论问题啊

shaozi402

回复 智露 的帖子! R3 G& N4 G8 z. }* h1 P% B+ \

4 D( Z. C4 h# I3 G8 n0 o肉眼是没有看到EB

智露

回复 zhouhuaxizhu 的帖子/ ~; O9 L" n4 z3 g% }
0 a( P! X' {+ \! W) X# }8 u: q
你用什么酶消化的啊？