求教：脐带间充质干细胞胶原酶消化后有大量细胞但养不活怎么办

edwardellen

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, Z& A2 g' e5 V/ I, ?1 T8 X/ ~- f+ a" \) o$ R3 D: ^
谢谢！
! m* V. z3 p. h( m请问您用的是哪种胶原酶？我用的是sigma的 Ⅳ型胶原酶。

flylover1221

回复 edwardellen 的帖子; A1 L: Y" H( R

( {5 R& a9 q: B* }我们用的是80目的不锈钢滤网，铜的应该也可以吧，只要做好清洁和灭菌消毒一样吧。

月_幻影

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) U, w, [; s4 D+ O  L; ?我没用过透明质酸的方法，我们这边都是用组织块法来养细胞的，酶消化法在大学的时候做过，转速是1000多，具体多少记不起了，不过你消化完后可以过一下筛网去除一下组织小块和红细胞，另外就是细胞的生长状态跟母体是脱不了关系的，每个人的体质是有差异的，不排除这种因素导致的细胞死亡，我这边曾经做过一根脐带，刚爬出细胞P1代就老化死亡了。。。

米东

生理盐水洗出血，两性霉素和双抗洗，再生理盐水洗，这样去血，去血管，这样能得到灭菌干净华氏通胶了。不要一开始就消化酶处理，你要等脐带间充质从肉糜组织里面长出来再处理。还有终止用临床培养基，不要带血清的，研发可以

cqstemcell

同意楼上的，先用酒精洗一次，再用生理盐水洗3次，尽量把镊子把血管里的血挤出来，不要有残留。不贴壁的话，可以考虑提高血清的浓度或者考虑是否有污染的问题，仅供参考