关于悬浮培养癌细胞球中低粘附培养的问题

maiweiqian

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& B, x( d, Q4 r& [/ a6 A% f我想做整个肿瘤干细胞球的免疫荧光，但是前辈，那个球怎么才能粘在片子上？如果我到时候用PBS洗或者加什么试剂去通透固定或者染色的时候，球会不会飘起来？前辈有没有什么好建议？打扰您了

superlamp

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6 z1 {; _7 F, l& b9 v+ _8 }% o9 n5 G8 r! ?, ]
先用层粘连蛋白(laminin)将圆形爬片包被后放入六孔或24孔板中，加入细胞球放入培养箱孵育两个小时，差不多悬浮球就粘好了，然后再去做荧光，基本上只要你操作不是很暴躁，球不会脱也不会散

maiweiqian

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& f' r8 h9 b, M. r$ D6 T$ W, y3 Y! F2 F3 q+ I6 G" l
啊，原来是这样啊，谢谢前辈指点啦，我回去试试。

sxltc

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  R& O! h- T8 o, t" {3 l- M! a; Z, q' o
师兄我真该早点看到你的提醒啊，我已经铺板了，师兄我想问，我没有低粘附的板，要怎么改进可以更好的得到细胞球呢？

superlamp

回复 sxltc 的帖子" q7 g2 ]8 _( L' u

) x* v) w/ e9 S. e) s- v貌似没什么其他好办法，什么铺胶啊，普通悬浮板子啊都试过，效果都不好

KINGxuridongshe

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( s+ b* S  C+ M& y7 B) g5 d/ c5 p你好，我最近在做A549细胞成球实验，但是老是出现细胞聚集成团现象，请问这是什么情况？联系试验了几次都是这种情况。

superlamp

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4 y' b( L2 c% ]  i& F
$ }7 T' P3 D( H* a$ X细胞密度太大喽