血小板会影响CIK的生长增殖吗？

gengtongyu521

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+ {) E8 o0 U4 d( L+ k/ u7 Q
4 ]* [. v/ E) |( F* F恩，不是血小板的问题，是没加自体血浆的原因。

chenzhengliang

很显然不是血小板多的原因，过多细胞凝聚死亡是没加自体血浆的缘故。& t8 Q8 U: _# Y1 I; b
自体血浆有维持细胞活性和防止细胞凝集的作用，细胞培养时一般都需要加入的，当然使用时别忘了56℃灭火30min，以除去支原体和相关补体等。
7 R  R+ [$ {: z; P9 t血小板对其他细胞生长没有太大影响，它在人体内也不过7~10d的寿命，考虑到CIK要2w左右才能回输，所以血小板还是不要太多。若你发现血常规里PLT超过200×10^9/L，一般PBMC分离清洗时可以把降速降到600rpm左右，这样血小板会被大量带走，培养起来也就更放心了。  ?' ]2 x$ g# x- F

jianglei_sd

chenzhengliang 发表于 2014-7-13 18:11
7 H! w3 [( Q. n/ u5 h很显然不是血小板多的原因，过多细胞凝聚死亡是没加自体血浆的缘故。4 T+ \3 N: U. z/ s
自体血浆有维持细胞活性和防止细胞凝 ...

/ D9 q& N8 |" G600rpm的速度会不会导致PBMC得率降低？

chenzhengliang

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4 k' d/ x" t+ Y* s* x9 K9 n7 X. |2 P- l
我指的低速离心是针对于血细胞分离机分离的PBMC，因为这种方式获得的PBMC细胞水平一般都在10*9数量级上，损失一些细胞问题不大。5 i$ R& q- x% {; n- v6 h
采集全血的PBMC洗的话最少也要1000rpm，再低细胞基本都看不到了。

jxydiandian

1.血小板对细胞增殖生长没有影响的，而且血小板没有细胞核，在体外无法增殖的，很快就会死亡，而且血小板要是死亡裂解的话，还能释放促进细胞生长的活性因子呢，当然了，毕竟残留的血细胞很少，所以这些活性因子也就更少啦，总而言之，对细胞没影响的；
+ k, b# T2 e+ V/ s( Q  v! D3 c2. 另外，就是在最后一步离心的时候，可以稍微降低离心速度，使血小板无法沉降。
1 N9 K( p: M9 U' i. T3. 你提到的细胞成团及死亡现象应该是加入的血清里含有纤维蛋白原成分吧，可能是血清没有灭火彻底。
# N& B4 p6 W9 h2 y* F: y3 k$ y以上是个人拙见，仅供参考