求助 关于脐带间充质干细胞分离的问题

听不到

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我去除了，但是还是有少量残余。我是用6孔板养的，就沿着组织块加了一点点液体

luyue6453

回复 听不到 的帖子5 F' f- a1 P3 `7 ]( ^
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把组织块剪碎后转到离心管里，用生理盐水冲洗几次然后离心去掉多余的生理盐水再铺板，少量的血不会影响细胞爬出的，没关系，试一下

287762010

啊、我这里做的有些一般5天后能出来，但是超过10天左右的细胞长得不好看，个头大，快要凋亡的样子~

569981454

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( ~6 y1 a/ Y' [8 X% g- J9 r0 Q
再等等，有时候需要十多天甚至半个月的。。。。1 w5 G- ~8 ^% b. P

听不到

回复 luyue6453 的帖子/ u9 T5 n* A# }# }$ e# C
7 U. W7 M! Y% e4 |2 W
我基本上就是这样做的，不过我听别人说铺板后第二天再都取出来然后全部离心再洗一次，再铺效果会更好，貌似是可以除血细胞更彻底一些，不知道有没有必要

听不到

回复 569981454 的帖子- G# @7 C9 D+ }
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这么久？那过程中你换液吗？大概几天能贴壁啊？还有我取脐带的时候直接是他给我的那种医院取样的袋包着放到冰里的，这个对后续工作有影响吗？还是应该放到培养液里带回来？

luyue6453

回复 听不到 的帖子; o8 q7 n+ _: Z1 U8 d

9 i3 @7 ~% A. S" Y可以的，有必要的，去掉血的同时，还能去掉华通氏胶，组织容易贴壁

569981454

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& n- j' y6 a$ ]1 X7 T! f回复 听不到 的帖子
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" D0 H4 U6 f& L* {3 @2 L, d个人认为这过程中应该肯定换液，组织块贴壁我没做过，不过也看细胞种类了，像表皮细胞贴的就比较快，你的细胞视情况而定。我的细胞十多天还行，半个月就有些老化了。还有像你所说的方法取脐带，只要时间不要太长（一天内）应该是没有问题的。

flylover1221

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! Z! G" P2 ^. J
+ s+ X$ W" [8 ]. q9 M6 ~理论上是7到10天，但我也见过5天就有的。至于你说加的培养基，我们是以摸过组织块为好，2到3天适量补液，算是半量换液吧。

沙漠狐o0

你难道不是在剪碎组织块之前就将血管去除么，怎么还会有血细胞呢？* K7 b/ T% `' J% b! o9 l' h: E! k
铺好组织块后第5天观察一下，换液；第8天再次观察会看到很多细胞，10天左右就可以传代了。