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楼主: Amanda121201
go

奇怪的细胞状态hucMSCs   [复制链接]

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发表于 2014-6-4 14:37 |只看该作者
回复 元芳 的帖子
$ L- E3 ?! E3 {' k& p- x5 g7 O7 \3 K
  ?( L# W, {# F$ L: k, o培养基是Gibico的DMEM/F12 ' V- ^# s' i# u8 b6 H
血清用的是corning的

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发表于 2014-6-4 14:38 |只看该作者
回复 jinfjun 的帖子# s" x9 l. o; Z8 x
. o7 \3 p* m% a- q. {6 u: F
这次是P3或是P4的吧 冻存液用的是自己配的 血清加上10%DMSO

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发表于 2014-6-4 14:40 |只看该作者
回复 chenjxcd 的帖子
0 g% O6 H% d& `/ k9 i3 A- C+ l/ i0 d# v5 F, J% v
营养不良是由于培养基换的少了么,MSC对胰酶听敏感的,每次不敢消化时间太久,怕会影响细胞的状态,但是有的时候也会出现已经一大片开始消化下来了,还有一部分很顽强的贴在瓶底,不下来,那样的话只能两次消化了
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发表于 2014-6-4 15:38 |只看该作者
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回复 Amanda121201 的帖子8 H( {$ }9 @2 H

$ ?+ k1 Y, u+ x0 ^6 ^9 n+ a9 k如果计数不准,细胞数远远超量,自然营养不凋亡;成团细胞部分常规消化时间估计有一定问题,看取舍,如需要,成团部分再2次消化看看,仅供参考哈
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发表于 2014-6-4 16:27 |只看该作者
传的时候没吹散吧。。。局部密度太大了
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发表于 2014-6-5 14:00 |只看该作者
回复 cantherinezhao 的帖子
) [$ ^, t5 m/ m
) D8 B2 d0 a5 W) [将这种培养后期的细胞收集起来(未消化前,显微镜下观察有很多褐色聚集细胞团),用流式检测MSC的8个常见指标,未见异常——即就分析的8个指标方面,未发现细胞分成了2群或多群细胞,只有1群细胞,这群细胞的CD表型符合MSC的特征。
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发表于 2014-6-6 16:55 |只看该作者
回复 dollar007 的帖子* {/ Q3 G- w# u# u7 @
* i; P, j4 f; s/ R* Q( d) n- s+ e
如果是这样,细胞的形态方式发生了改变,但是表达没有发生改变, 或许是一个有趣的研究方向,细胞聚集,他们一定有目的
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发表于 2014-6-6 16:59 |只看该作者
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. ?5 H# v  K4 f: L( u8 P
* g+ }8 A" v% B- s9 n" O8 }/ n共同学习

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发表于 2014-6-6 17:03 |只看该作者
回复 dollar007 的帖子, K" w2 F/ Y8 Y# p% O

- \" C% y5 `6 c1 k1 s. J不知道您是否还在继续这个实验,有可能细胞顺向分化了
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发表于 2015-4-1 15:50 |只看该作者
可能是细胞重悬是没有吹匀
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