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楼主: Zhouhaiyan12388
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干细胞培养是不是要特殊培养基   [复制链接]

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发表于 2015-12-1 08:53 |只看该作者
维持的话,早期用feeder养时,用的KSR加bFGF;现在有更便捷的培养基,E8和mTSR1,后者更贵,一瓶500毫升2000多。B27和N2一般在进行分化protocol时才用。
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发表于 2016-1-13 23:17 |只看该作者
本帖最后由 liqiang8589 于 2016-1-13 23:18 编辑 & Q- J* m0 z4 b/ g6 n( c

& R6 k  m% o, ^  T) o! ^8 z2% --- FBS
2 A6 R* }$ F0 T# t" w/ Q5 ng/mL --- rh FGF basic
( \, W6 i% m+ [- T: g8 t5 ng/mL --- rh FGF acidic
6 W9 W+ D) o- G; A4 B2 q. Z5 ng/mL --- rh EGF) q: M8 {! B2 o, }
2.4 mM --- L-Alanyl-L-Glutamine3 }) n6 q! r- l6 ~& g5 A
---------------------------------------------
% T! ]% y" g4 g% W3 ?6 X+双抗4 u3 y" M% V6 x' i
这个是在ATCC网站上找到的---低血清人间充质干细胞培养液/ P/ x! k: k+ |4 @5 z. b0 l: Y
现在论文好像都都在用DMEM-low glucose培养液为基本培养液
1 r' m2 p* f4 I/ \- [
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发表于 2016-1-19 14:58 |只看该作者
干细胞培养一般是DMEM等营养较全面的基础培养基,加一些相关细胞因子比如kGF,EGF,bFGF等。根据培养细胞类型添加血清。基础培养基+细胞因子+血清(+饲养层)+双抗。
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发表于 2016-5-12 15:22 |只看该作者
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可以参考文献或者专利,有的干细胞比较好养,基础培养基DMEM/F12加血清就好了,但是血清中的一些成分会导致细胞衰老或者分化,如果传的代数不多,基础培养基就可以满足培养要求。如果传代数多,或者对细胞质量或者数量要求比较高,就可以用专用干细胞培养基,那些培养基会要求加少量血清或者不加血清,对细胞分化影响比较小
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发表于 2016-8-26 19:21 |只看该作者
哇!感觉这个帮助很大!但还是没有弄明白是加血清还是不加 ?

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发表于 2016-11-17 14:27 |只看该作者
我们实验室用的是$ H+ {) A$ \' c
15%ksr
! a8 I/ ]& w9 @/ \" \高糖DMEN
' a  u, [1 S( W1%NEAA
) N- _  G6 z  T  Y1%Pruvate
  I/ m2 w, E1 c5 `! W1 _1%Glutamine
; j5 i" X8 B5 M, C2 o, Y" ~1%双抗
' M$ \# W6 I- {4 r: `; t1%FBS
; ^4 f& [( c5 u0.1%LIF外加beta巯基乙醇
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发表于 2017-3-8 10:18 |只看该作者
这要看你要保持干细胞的全能性还是要分化成其它细胞了。" d' Z7 z* n' m7 m0 g
如果是iPS的话,如果是要保持全能性,好像普通高糖的DMEM就行,不过就是要每天换液。我们实验室用的是ajinomoto的ak02,可以保持很好的全能性。
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发表于 2017-4-24 08:55 |只看该作者
干细胞培养基一般加了一些特定的细胞因子,避免分化;一般多用无血清培养基,而且不同类型的干细胞所需培养基的类型也不相同
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