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楼主: viv2005
go

大家看看我这个原代的MSC,小鼠的   [复制链接]

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包包
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发表于 2014-7-7 09:15 |只看该作者
重做吧,分化了,回不去了
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发表于 2014-7-7 10:43 |只看该作者
长得挺正常的呀!你可以做个流式看一下是不是你想要的细胞!我觉得很正常!估计流式结果不会很差!
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发表于 2014-7-7 13:03 |只看该作者
目测看,细胞分化了。其实血清浓度血清质量对MSC的干性有很大影响的。血清浓度高其实容易分化。传代密度也有影响,太稀也会分化。建议降低浓度,传代密度提高。现在看,有些变成肌细胞了或者成纤维细胞了。你可以试试染色平滑肌标志蛋白SMA。我师弟也是这样的现象,染个平滑肌蛋白结果大部分阳性。
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发表于 2014-7-8 04:13 |只看该作者
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回复 dudumao17 的帖子, V0 O! p. i; ^0 q# m/ h2 b% s

( T* `. L! X( Z* z( j+ ]7 n请问 小鼠 life是什么东西?

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发表于 2014-7-8 04:13 |只看该作者
回复 wanglimaomao 的帖子
& o6 p+ ]# w7 A. F( I1 b4 ?# P, P$ {7 T# b# d
谢谢,我用得10%FBS,版上我看都建议用15%呢。
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发表于 2014-7-8 12:31 |只看该作者
回复 viv2005 的帖子
! C/ o# E  ]  j, W) q; c. F/ k+ R+ r; {7 W" m6 A
原代为了促进贴壁和增殖是可以高血清的,但是后期就不能太高了。因为血清成分比较复杂,很容易分化,一般原代MSC我们只能用前5代,后面就分化严重了。一般养一个月都能自发分化为脂肪细胞
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发表于 2014-7-9 09:24 |只看该作者
回复 viv2005 的帖子
0 p3 _+ `7 \% T( x* a- ?/ t
. f1 J) }+ H. S7 T% g( X+ U小鼠生长因子
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发表于 2014-7-9 09:28 |只看该作者
回复 viv2005 的帖子
% f" L0 d1 u; Z
; Y. y! s5 X& X) J; [7 [: W( C& V是LIV,加少量,就可以了,要是以后觉得培养环境可以,可以不加
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发表于 2014-7-12 15:47 |只看该作者
感觉楼主的细胞大部分成纤维细胞及造血干细胞,可能是换也的时间点控制不好,我们一般在第3小时的时候就换第一次液,这样会去除掉大部分的杂细胞,然后再接着培养。培养基中最好加入谷氨酰胺哦。
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