求助：大家帮我看看这个细胞，黑点点是什么

碧螺春的秋天

回复 康小纬 的帖子
8 o3 D  d( s: J. ?* o5 ]
# `! A1 O) z! I* W5 g胰酶消化

细胞海洋

回复 Anonymous 的帖子
" T$ `' G- q# X- z7 G
6 I' H6 n& _' z9 e- S7 }匿名无法评分 请下次不要使用这个道具

creatine

回复 康小纬 的帖子5 D" A) s7 Y$ O5 ~1 g
) b8 `# v8 `) h. L
我们那一批的血清都有问题，后来换了....

bleachmen2

国内的血清中，通常灭活之后都会有絮状沉淀出现，而黑胶虫出现时，所使用的血清被反复冻融过多次。所以推测，所谓的“黑胶虫”其实就是血清中的某些蛋白成分的物质，经过灭活之后丧失活性，在培养基中，镜检见到的运动其实是这些物质在溶液中做“布朗运动”。随着细胞消耗培养基，这些物质越来越多，最后细胞所用的营养消耗完，细胞容易死亡。

康小纬

回复 bleachmen2 的帖子
3 ^: K) D# A$ u  P% i( g( R) z! o  F. W1 [7 l- B7 K% B
我们实验室没有用过国产的血清，一直都是用的GIBCO的，假如是血清的原因，为什么我换到基质胶以后还会有这种状况呢，并且黑点也会越来越多，这个怎么解释

康小纬

回复 creatine 的帖子  m6 [! \2 @& U8 H
  G' d7 S9 m/ @' _4 K+ J+ [- j
我们实验室用的全是gibco的血清，而且我们用同种血清养的其他细胞都没有问题

bleachmen2

4 m& D8 Q8 W' P# z  V0 g/ C) P

  u. W0 ~" k$ R8 }; K" v回复 康小纬 的帖子9 w: r, ~# {- }3 a) T

+ p7 v9 T8 J3 T3 c5 d
, x8 ^- d2 i* l7 O, l$ Z纳米细菌——哺乳动物体内最小的细菌 细胞培养时所使用的血清通常采用过滤法达到无菌的目的, 通常采用直径0.1 μm的滤膜过滤除菌. Kajander研究发现, 0.1 μm的滤膜过滤并不能有效地清除血清中的纳米细菌, 但是血清经过0.05 μm的滤膜过滤则能有效清除纳米细菌污染. 细胞培养条件下的纳米细菌经过0.2 μm的滤膜过滤后约有3%的纳米细菌可以通过滤膜, 而在加压过滤的情况下, 约有50%的纳米细菌可以通过0.2 μm的滤膜. 刚刚经过过滤的纳米细菌在相差显微镜下无法发现, 但在不含血清添加剂的细胞培养液中培养24 h后, 即可以用相差显微镜观测到. 电子显微镜观察显示, 纳米细菌的平均直径为200 nm, 而子代纳米细菌的最小直径仅50 nm.: T, w8 g' A. a9 p: r. ^
由于纳米细菌在标准微生物培养基中无法生长, 并且即便是在最适宜其生长的细胞培养环境中, 纳米细菌的生长也极为缓慢, 其新陈代谢率仅为普通细菌的万分之一, 这使得许多基于检测细菌新陈代谢的微生物学方法无法检测纳米细菌的存在. 由于纳米细菌难以用传统的火焰法和乙醇法固定, 并且大多数染料无法穿透其细胞壁, 而且不能用普通显微镜对其进行观察, 因此常规的细菌学染色法并不能检测到纳米细菌的存在. 通过Kajander et al 的研究, 发现70℃干烤10 min, 可以将其有效固定; 另外, 用茜素红S、刚果红以及硝酸银染料可以使纳米细菌着色; 而培养状态下的纳米细菌可以在放大400倍的相差显微镜下清晰地观察其生长情况; 用DNA荧光染料 (Dapi或Hoechst) 按普通细菌DNA染色的条件对纳米细菌DNA进行染色均不成功, 而当按照线粒体DNA以及病毒DNA染色条件, 对纳米细菌DNA进行染色时, 荧光显微镜下可以观察到特征性的荧光; 用纳米细菌特异性抗体进行荧光染色也可以清晰地显示纳米细菌的存在; 利用电子显微镜对经过负染的纳米细菌进行观察, 可以清晰的显示80-350 nm大小、单独或聚集成簇的纳米细菌以及其表面的生物被膜(biofilm)结构; 而用透射电镜对纳米细菌的超薄切片进行观察, 可以清晰的显示其内部结构。

bleachmen2

回复 康小纬 的帖子
2 x$ {. X! z8 @' W; t( l) _; T& M; g" ~& Y! Z( B: A
我培养的过程中也有，但是没有出现细胞死的情况。