MSC随着传代次数的增加，细胞越来越大，是什么意思，分化了吗？

aochongyu

细胞估计是老化了，你可以测个流式就是有点贵，也可以先观察一下生长的状态还是漩涡生长吗？以及细胞形状

hefan1234

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% o2 B5 O6 I; |0 P/ l8 @回复 20084720113 的帖子) ?! T! |/ K) G, n4 t

& p7 m7 v8 J  L3 z可能是分化或老化了，你培养的是什么间充干呢，一般来说间充干不应该到6，7代就老化了，我们培养的间充干一般10代以后才开始老化变形。如果做细胞传代试验，一定要控制好传代细胞浓度，用T瓶培养的话，一般1传3或1传4，细胞铺满80%就可以传代了，不要等长满再传，细胞长满T瓶后细胞之间会争夺空间和营养物质并分泌抑制细胞生长的因子，虽然传代后细胞会继续增殖，但是受过抑制的细胞更容易老化变形。

倒腾细胞

回复 aochongyu 的帖子6 ~/ {" H* q# T- X7 y% o
0 X2 B( f' p. d1 |' K
前辈养出来的都是漩涡生长吗？感觉好难，厉害。。。

倒腾细胞

回复 hefan1234 的帖子1 x* W. Z8 r# t7 ~1 z) d$ A

3 [2 ~: y" @1 S+ w: f我们养的是SD大鼠的MSC，最多到第五代久不行了呢。

hefan1234

回复 倒腾细胞 的帖子! f6 h3 F$ r+ ?' b) w% f2 z

  d+ c' S# Q3 _. z! M5 b% H不好意思，我以为是人的，鼠的MSC是传不了很多代。

辛西雅

回复 CELL007 的帖子$ A; t( ]9 Q( ^

. c2 u: p8 L; J6 M用那种细胞因子呢，浓度多大的合适啊

ytumuyangren

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. m1 ?7 |5 h  J5 {$ K$ u5 A( a% [& C$ f
  s! U9 ?* \* D8 `2 E大鼠的MSC一般传3-4代就可以了，我们之前用的是a-MEM培养基，没有添加任何细胞因子，据说适量的bFGF（不同公司的不一样）会有助于间充质干细胞的生长。另外，如果经费充足可以尝试无血清培养体系，无血清体系培养时间比较长，但是能多传几代，而且细胞表型维持的比较好。

倒腾细胞

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" f3 V: x/ J% c0 i5 K" e" {
* n4 E, e  u( @前辈 阿尔法-MEM属于低糖还是高糖呀？它和单纯的MEM有什么区别呢？当然，最重要的还是这个培养基需要多少大洋？

uslzhang

MSC传代次数多了不是“变大”了，而是变得扁平了，看上去变大了。MSC贴壁是变得扁平是其MSC特征衰退的象征之一（贴壁是正常的应该是梭状细胞），不过并不一定是6代以后的老化现象，有时低于6代也出现这种扁平现象，有时更高代次也不一定出现。

ytumuyangren

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1 B( {4 U- S1 K3 Z' r6 l6 ?$ A0 C* M/ C/ m, b1 t
a-MEM和MEM还不一样，最好用无苷的a-MEM。我们用的都是粉剂，买回来自己配置，一盒是十包，可以配置10L的培养基，一盒的价位应该在500-600之间吧，具体我也忘记了。你咨询一下你们经常订购试剂的公司，他们对这个很在行的，呵呵，预祝实验顺利！