干细胞培养问题？细胞形态不正确！求帮助...

pcljsw2008

这种情况有可能是初始接种密度太低造成的，时间生长过长，中心细胞老化了，分生出来的细胞状态还是可以的，传代试试，老化的消化不下来的

倒腾细胞

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9 a6 T+ R3 A. s/ q: W' W& [# S9 U# Y- D7 V. ~7 J2 L) D4 @
前辈们养MSC的时候，在原代都可以看到克隆样生长的集落吗？

倒腾细胞

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3 p0 r/ |, o/ {' ~5 n
' \( {3 i" d- F+ }! \前辈 你们消化用的胰酶一开始会分装吗？还是一整瓶一直放4°冰箱保存，话说我们那瓶胰酶用了四个多月了吧。细胞有的时候消的下来，有的时候消不下来。除了细胞本身的问题，胰酶是不是也有点不给力了呢？

yaolinzhang

回复 倒腾细胞 的帖子) K; o2 q; n$ z8 F. R

+ B" O: K* m) A& `! k$ T可能有关。我们事先分装于-20，用时拿出来。

倒腾细胞

回复 yaolinzhang 的帖子; v1 ^5 i! S- ]
* x, z' g- j9 |& H7 q) o
那前辈你们是用离心管分装成1ml 1ml的吗 ？  我用T75比较多，当然顺便请教下你们用T75和T25是一般加多少胰酶去消化呢？

yaolinzhang

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$ L3 @5 V: ?3 ~/ J+ y4 \分装于1ml离心管中，T25一般加1ml，T75加2ml，PBS冲洗完之后消化；2min左右中和。

pcljsw2008

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: _- [5 g, H. ?7 y0 t整瓶分装成10ml没管，零下二十度保存，融化了就不再冻了，一直用到结束

倒腾细胞

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' q/ n1 S8 _; n' ^! H/ d
% S7 ^  _+ b$ C" o多谢前辈

soarfei

个人认为细胞已经部分分化

lvchen520

有老化迹象。