干细胞培养问题？细胞形态不正确！求帮助...

pcljsw2008

这种情况有可能是初始接种密度太低造成的，时间生长过长，中心细胞老化了，分生出来的细胞状态还是可以的，传代试试，老化的消化不下来的

倒腾细胞

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5 m7 P. q% n: t+ v0 N前辈们养MSC的时候，在原代都可以看到克隆样生长的集落吗？

倒腾细胞

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前辈 你们消化用的胰酶一开始会分装吗？还是一整瓶一直放4°冰箱保存，话说我们那瓶胰酶用了四个多月了吧。细胞有的时候消的下来，有的时候消不下来。除了细胞本身的问题，胰酶是不是也有点不给力了呢？

yaolinzhang

回复 倒腾细胞 的帖子0 B1 o8 }4 O$ D  g7 l* ^
9 X5 s* h+ w3 D/ x; f& {4 l6 f: j/ Z
可能有关。我们事先分装于-20，用时拿出来。

倒腾细胞

回复 yaolinzhang 的帖子. [9 C4 i+ w! m2 d) S6 b% q6 ?0 A+ F& X
6 \& y; T. A2 H
那前辈你们是用离心管分装成1ml 1ml的吗 ？  我用T75比较多，当然顺便请教下你们用T75和T25是一般加多少胰酶去消化呢？

yaolinzhang

回复 倒腾细胞 的帖子4 @6 e; v. E' t5 M+ }! M2 L0 I

6 k- C6 x' `* c) l( h分装于1ml离心管中，T25一般加1ml，T75加2ml，PBS冲洗完之后消化；2min左右中和。

pcljsw2008

回复 倒腾细胞 的帖子! a) T# |7 \  W9 S, v5 H

3 U) ~$ J" Z9 o( n整瓶分装成10ml没管，零下二十度保存，融化了就不再冻了，一直用到结束

倒腾细胞

回复 yaolinzhang 的帖子' C& Y! F/ D: u# u, ^" C
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多谢前辈

soarfei

个人认为细胞已经部分分化

lvchen520

有老化迹象。