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楼主: zhen022
go

养MSC大家都用什么血清+基础培养基?   [复制链接]

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发表于 2014-11-12 11:13 |只看该作者
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我用的GIBCO的500ml装,400多,顺便请教各位一个问题,人的骨髓基质细胞多长时间能贴壁,我看文献上说都是2-3天,可是我的3天了几乎没有贴壁的,只有一些棒状细胞,一摇瓶子就飘起来了,怎么办,实验的第一步就这样,恳请明白的人指点,跪谢!!!
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发表于 2014-11-12 12:03 |只看该作者
回复 wangzhuo 的帖子
% Y" R7 [5 L. r' X" T+ Q4 R* n0 `; B' E1 t. {
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发表于 2014-11-13 15:24 |只看该作者
同用高糖DMEM/F12+10%FBS ,gibco的,感觉养起来效果不错。8 ~+ s) d; O9 b! }1 |
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发表于 2014-11-13 15:27 |只看该作者
回复 yuanyecat 的帖子
9 r% y+ g) x; ~
& d! q5 d. r# g, X7 a2 Y5 L请问这位老师,你们用的SR具体是什么牌子的。。货号方便透露否。。
2 t1 }% C3 x- x. \1 a& z# M3 u# Q* o& Z
我曾经用过SR,10%。但是感觉SR里缺少某种可以使细胞贴壁的物质。。4 i2 Z6 L( \1 i, u- G: {+ z
' Q2 z$ W/ o2 h" K" {1 _: ~
第一次上SR的时候,贴壁用了3天。。我差点都要扔了他了
; m, Z, k" v+ R) k6 {
) n5 p% U7 h/ ^! _! A  d& s, P然后又半量更换回FBS,又恢复正常了,做了几次,都是这样。请问你们用SR的话效果怎么样?
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发表于 2014-11-13 15:48 |只看该作者
尽量不要分装的,质量不稳定!
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发表于 2014-11-18 15:35 |只看该作者
四季青我们这边都不用哦~Gibco的我们倒是一直用得都不错
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发表于 2014-12-22 11:23 |只看该作者
回复 听不到 的帖子. L+ E# r/ _' {, C) }8 o! B

+ b0 q2 r: k' I+ Y7 ^你用的是GIBCO的MEM吗?多少钱一瓶的
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发表于 2014-12-22 12:31 |只看该作者
回复 倒腾细胞 的帖子0 w' h- Q( A) z* S6 r4 h! A. y% T

" G5 s4 U# A' M5 \7 G! H以前用的了,gibco的粉末装的,不知道多少钱,别人买的
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发表于 2014-12-22 14:33 |只看该作者
回复 zhen022 的帖子  e: E0 P; b' x; H

, E6 A7 }/ P/ C" n) s! r+ i/ \gibco的血清比较好用些,你可以尝试一些血清替代物,B-27之类的,血清这东西货号批次变化很大,有时候一个牌子的血清不同批次养出来的细胞都不一样
# `3 _0 p# t9 V$ X8 P. ?  r! [
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发表于 2014-12-22 14:36 |只看该作者
回复 zhen022 的帖子! y7 f+ W: h9 \* ~* p
- Q9 S- \3 a0 z
现在不是都有商品化的无血清培养基吗,如果用量不多的话可以买一些商品化的用。传到4代就长不起来了说明真有问题,一般间充干能传到13代左右,在往后传代就增殖倍数很低了,几乎1-2倍增殖。而且形态也发生变化
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