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楼主: 听不到
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[请教] 求助 DMEM/F12特别容易变黄正常吗?   [复制链接]

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包包
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21楼
发表于 2014-9-17 18:56 |只看该作者
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回复 听不到 的帖子4 ?6 r# m) y6 `2 H$ s
: S% M1 d9 w( t* Z) [
你仔细观察一下细胞,或者做个支原体检测。
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22楼
发表于 2014-9-17 20:11 |只看该作者
回复 刘彩云 的帖子
9 K7 c2 I+ m" F) d! s9 ]$ S0 |) T& I5 z! u
但是我细胞长得并不慢,这样是不是就可以排除支原体污染了呢?做支原体检测得要钱吧...

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23楼
发表于 2014-9-23 13:17 |只看该作者
回复 听不到 的帖子
! u1 l- U  k6 z2 h5 p- `( `1 K! x5 K* L1 G( Q# g$ I
我们实验室用的DMEM/F12也这样,但是我们加的培养基没有第二天就完全变黄,只是红色变浅,然后偏黄,可能跟里面的PH指示剂有关。如果培养基检测不是污染的话就没关系,细胞还是可以正常培养的。
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24楼
发表于 2014-9-25 12:01 |只看该作者
回复 hefan1234 的帖子
+ M5 a  V* y9 u6 W! |( Q0 g0 d2 o# B. G5 c& d8 e
那就好,我特别不放心,感觉一加进去就是黄的,就特别害怕对细胞会有影响,它是ph指示剂不是酚红么?
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25楼
发表于 2014-9-25 12:51 |只看该作者
一般来说是酚红,很早以前我们自己用粉末配培养基的话也是偏淡黄色的,加点碳酸氢钠就会变红了,但是你的排除培养基污染这方面的问题,因为污染也会导致培养基变黄,特别是支原体污染导致培养基变黄但是还是清澈的,所以不像细菌和真菌污染会浑浊那么明显。
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26楼
发表于 2014-9-25 16:50 |只看该作者
DF12本身比DMEM浅,就容易变黄。变黄说明细胞液变酸。但是需要注意:1.污染,变黄而且浑浊;2.细胞密度过大;3.培养基暴露在空气中时间过长。
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27楼
发表于 2014-9-26 10:57 |只看该作者
回复 听不到 的帖子" L" y. B3 J0 j7 e6 i
3 a, q0 J6 t. V7 V  I4 S+ s4 t( w
不一定,要看养什么细胞了呀!如果养MES就是要每天换液,而且当细胞量比较大时,每天换液黄的都比较快;其他的细胞可能就慢一些。除了培养液配方不同外,很大的原因可能就是ph变了,如果细胞没有出现明显异常,问题就不大。但是,最好做一下支原体检测,我们实验室有段时间出现类似情况,结果部分细胞检测出支原体污染。
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28楼
发表于 2014-9-29 11:25 |只看该作者
回复 hefan1234 的帖子$ b8 o6 x5 u! _) P8 e

9 b# ?9 `4 ?4 @- _& W9 v8 N赶脚我得试试支原体检测这个,但是完全不会啊...

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29楼
发表于 2014-9-29 11:26 |只看该作者
回复 yeshch 的帖子' c6 Z( _& w# S7 L
' |3 }" b& o5 }: w
之前听说支原体污染是很常见的,所以一直默认我自己的细胞是有支原体污染的...但是对细胞生长有什么影响吗?感觉好像生长的都还好...
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30楼
发表于 2014-9-29 16:59 |只看该作者
回复 听不到 的帖子- L9 Q9 X, {4 r8 v* I9 y$ f
& G4 x$ u/ H( m5 M
一般情况下,支原体感染的细胞确实不会出现很明显的症状,这也是支原体污染广泛的原因之一。但是,支原体污染过的细胞在某些基因的表达上是会受到影响的,比如支原体可能会抑制某些基因的表达。因此,有支原体污染的细胞做出来的实验结果就会受到质疑。所以发现支原体污染后最好及时处理,扔掉或者药杀。个人经验,仅供参考
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