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楼主: 水念人倦
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关于流式图的一个问题,求指点   [复制链接]

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发表于 2014-10-16 11:20 |只看该作者
回复 依然可比克 的帖子- w4 H) D, U, X2 x
8 _. k1 L3 j5 a1 k4 U; U
多谢大神指点,这是P2的UCMSC,我打算优化一下实验方案,看看左边的那一片会不会消失,污染的概率不大,到目前为止大家点板子都没出现阳性。另外画门的时候,因为觉得碎片比较多了,细胞的PARENT有点低,结果不太好看,所以就把确定是细胞的都圈起来了。7 m, d: h* G" V& M$ v3 L2 `
另外还有一个问题想请教一下,前一阵看有个培养基的宣传文件号称做CD90的阳性率能到99.8(没有上图,比较怀疑可信度),但是个人做的时候始终觉得CD90的高阳性是很难达到的,不知这位老师一般阳性能到多少?ISO 5%-10%的情况下。
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发表于 2014-10-16 11:38 |只看该作者
回复 水念人倦 的帖子9 O& m, ?) i' n
7 w) [) d& q0 R' T
可能是细胞本身损伤或操作过程伤害细胞,染抗体的溶液可加点血清, ex: PBS + 2% FBS
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发表于 2014-10-16 12:47 |只看该作者
回复 水念人倦 的帖子
' i6 Y8 Y9 M5 H0 A0 M7 |* a4 Z% j* @" v  A# v* |; M/ G( }+ H  c( P
我没做过你这个细胞的实验,所以无法回答你,至于广告上的东西看看就行,如果想要发现真相还是要自己做了实验才知道,如果你的实验是科学的结果是可重复的,那么你的结果就是事实了。呵呵,继续加油!
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发表于 2014-10-16 16:06 |只看该作者
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回复 WeiTing 的帖子1 Q8 F% u. P' ]# `& J( K) f5 ^

: F/ k+ a( {- c" W" b谢谢!

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发表于 2014-10-16 16:06 |只看该作者
回复 依然可比克 的帖子- ]/ a# h) c- ]! Q9 b% X5 u

, Q1 u: T. S: x# \多谢!

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发表于 2014-10-16 22:47 |只看该作者
回复 水念人倦 的帖子/ O5 ^: u% j' [# I" j& t4 ^* R- C* S

5 k) ^# A5 ?; g2 d4 ?" b不客气。

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发表于 2014-10-17 09:01 |只看该作者
回复 依然可比克 的帖子$ g# J3 T/ ^8 P; C- W, Y
# e* h2 m$ m# A9 i/ O0 i! W
你应该经常做流式吧,我上面说的细胞碎片其实是包括凋亡的细胞,和不完整的细胞的,我们平时都是这样说的啊。而且我也说了可以做个凋亡检测。你所说的画门是没问题的。因为我们分析时是分析我们需要的细胞,所以圈出来需要的群落就行。 根据FSC与SSC流式图可以清楚看到两群细胞,说明细胞的状态不是很好。而且也可能是消化的时候时间或者酶的浓度等造成的。
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发表于 2014-10-17 09:03 |只看该作者
回复 colins 的帖子
( k0 d6 D9 o: s7 ~# E1 r6 M& N' r$ W
可能是楼主消化时候出现问题。
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发表于 2014-11-20 09:19 |只看该作者
个人觉得你的细胞是不是不太纯,混有其它细胞呢?感觉这个有点像两种细胞耶~不过制样的时候还是得小心点哦~动作尽量轻点,尽量减小细胞损伤
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发表于 2014-12-25 12:08 |只看该作者
也看到过一次,不知道为什么,有大神指导吗
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