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楼主: 水念人倦
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关于流式图的一个问题,求指点   [复制链接]

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发表于 2014-10-16 11:20 |只看该作者
回复 依然可比克 的帖子0 m: {  h' ~; T, W

$ t3 ^) R2 K9 O# L: z多谢大神指点,这是P2的UCMSC,我打算优化一下实验方案,看看左边的那一片会不会消失,污染的概率不大,到目前为止大家点板子都没出现阳性。另外画门的时候,因为觉得碎片比较多了,细胞的PARENT有点低,结果不太好看,所以就把确定是细胞的都圈起来了。2 Z5 C! \5 S/ t: i* k
另外还有一个问题想请教一下,前一阵看有个培养基的宣传文件号称做CD90的阳性率能到99.8(没有上图,比较怀疑可信度),但是个人做的时候始终觉得CD90的高阳性是很难达到的,不知这位老师一般阳性能到多少?ISO 5%-10%的情况下。
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发表于 2014-10-16 11:38 |只看该作者
回复 水念人倦 的帖子8 Q& t. ^0 u, E7 t2 z, p

! e/ V' T9 H; }9 J可能是细胞本身损伤或操作过程伤害细胞,染抗体的溶液可加点血清, ex: PBS + 2% FBS
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发表于 2014-10-16 12:47 |只看该作者
回复 水念人倦 的帖子
7 ~; ^8 g2 m( Z/ Q/ |
# P/ \( z" g1 q- b7 U) K我没做过你这个细胞的实验,所以无法回答你,至于广告上的东西看看就行,如果想要发现真相还是要自己做了实验才知道,如果你的实验是科学的结果是可重复的,那么你的结果就是事实了。呵呵,继续加油!
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发表于 2014-10-16 16:06 |只看该作者
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回复 WeiTing 的帖子4 z7 }3 z9 {. R

  R) F& l% ?/ @: p0 U4 T* G. k谢谢!

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发表于 2014-10-16 16:06 |只看该作者
回复 依然可比克 的帖子
* C1 Y$ h3 D0 w# G# [9 d6 J
. V) f% o4 {+ s4 _1 t7 ]. }多谢!

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发表于 2014-10-16 22:47 |只看该作者
回复 水念人倦 的帖子
2 S0 N) Q6 Q6 H! H4 R0 `6 k  Z4 }( q% z9 O8 l( e" ^+ m" N
不客气。

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发表于 2014-10-17 09:01 |只看该作者
回复 依然可比克 的帖子8 M) r4 o6 Z3 V) t
. S( t1 J5 ~, e  C' t
你应该经常做流式吧,我上面说的细胞碎片其实是包括凋亡的细胞,和不完整的细胞的,我们平时都是这样说的啊。而且我也说了可以做个凋亡检测。你所说的画门是没问题的。因为我们分析时是分析我们需要的细胞,所以圈出来需要的群落就行。 根据FSC与SSC流式图可以清楚看到两群细胞,说明细胞的状态不是很好。而且也可能是消化的时候时间或者酶的浓度等造成的。
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发表于 2014-10-17 09:03 |只看该作者
回复 colins 的帖子( F: [- w5 V% v" D6 C1 n

( F) W1 m7 E+ ]9 E* F# F- ]8 G可能是楼主消化时候出现问题。
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发表于 2014-11-20 09:19 |只看该作者
个人觉得你的细胞是不是不太纯,混有其它细胞呢?感觉这个有点像两种细胞耶~不过制样的时候还是得小心点哦~动作尽量轻点,尽量减小细胞损伤
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发表于 2014-12-25 12:08 |只看该作者
也看到过一次,不知道为什么,有大神指导吗
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