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楼主: yinchong42
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[请教] 请问WB封闭到底是BSA好用还是奶粉好用?   [复制链接]

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包包
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发表于 2014-12-22 11:07 |只看该作者
磷酸化抗体的时候还是选BSA,只是洗膜的力度自己需要好好把握。一般的就用5%脱脂奶也可以。
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发表于 2014-12-23 14:22 |只看该作者
看你做什么实验吧。我们做if比较多,上司说BSA是最好的blocking buffer,其次会用serum,最后才会选择奶粉。9 N" M" `: ^( e: D, P' p3 o
不过我就只用过goat serum 和BSA. 没有用过奶粉……; k& Z4 j  n7 Y1 E: Y
之前用goat serum的时候效果还蛮好的,昨天第一次用BSA,今天看看效果怎么样
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发表于 2014-12-30 15:30 |只看该作者
脱脂奶粉便宜又好用
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发表于 2015-2-1 18:56 |只看该作者
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我们一直用的1%的酪蛋白,和5%的脱脂奶粉效果差不多,不过脱脂奶粉比酪蛋白贵一些用的费一些。
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发表于 2015-2-27 21:54 |只看该作者
看你的情况了,我们一般是用脱脂奶粉做,如果效果不好也会考虑换用BSA,建议你自己根据自己的实际情况去摸索比较一下。
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发表于 2015-3-4 11:19 |只看该作者
封闭和一抗一般都是用的5%的脱脂奶粉,二抗用2.5%。。偶尔做磷酸化抗体的时候,尝试用过BSA,背景确实会多很多。 总体看来跟题主的情况类似,奶粉杂带少,BSA杂带多
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发表于 2016-8-26 10:17 |只看该作者
一般蛋白做wb用5%脱脂奶粉即可,奶粉的封闭效果比BSA好。磷酸化的蛋白要用5%BSA,因为奶粉中含有磷酸化的酪蛋白,会出现非特异性条带。
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