CIK细胞回输量高低限问题！！！

lyj-0017

回复 meister 的帖子' X" o2 @) f& _6 O2 R
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你们采集80ml外周血：) m2 @/ r  ]4 ?0 F2 H, |9 l
1、一般能分离得到多少单个核细胞？
5 _. d5 v: q' r* z7 n5 m2、培养时间一般是多久？6 m/ U- G" P0 B: ^! e
3、你们除了添加常用的IFN-r、anti-CD3和IL-2之外，是否还添加别的刺激物？
3 x4 U: P& T9 {: l) m& ^4、细胞计数方式，是用血球计数板还是细胞计数仪？

hefan1234

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% A) b4 B% ]! Y4 l关于回输时间的问题，大家的培养流程不同导致回输时间也不同，有版主说培养10天就能达到10亿以上可以回输了。我们实验室是根据自己的培养流程，定期取样检测，结果显示培养培养两周左右比较好，根据病人个体情况会有1-3天的浮动。

chimo100

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2 p: W$ v) Z& q, P$ h
9 \  B6 Q1 g  ]' a; O我们实验室Treg的标准是低于5%，我们一般在3%左右

chimo100

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/ d4 G+ B) z7 g/ |6 o2 q' P3 L+ z5 v( c4 ?
其实CIK细胞生长曲线的话，21天还是在对数生长期的，14天开始回输，每隔一天回输一次，四次回输完也不会到21天，所以也没有关系的。当然每个实验室有自己的做法。

沙漠狐o0

我们实验室一般50~80ml血，培养12天左右，补培养基4~5次，收获的细胞大概有3*10^9.

lyj-0017

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: j. }3 N# {7 W8 j" N
( O8 z4 q# _. u# ?- O是最多能到扩增到3吗？分几次回输？

fenlichong

我们一般采血100-120ml，培养两周，每次回输细胞量可达100亿。回输时加白蛋白，作用是可防止细胞絮集，利于吹散，并补充营养，增加血容量和维持血浆胶体渗透压等。

meister

回复 lyj-0017 的帖子/ k5 J7 g3 T% t! i: L, W* ~3 m( `8 Y
4 E5 v& M% \2 D8 [4 p
单个核细胞不一定，每个样本都不一样' P6 g& \) H" u% _  N6 m
培养时间一共16天6 B9 C" r- h  h2 Z4 M1 q' @9 K
添加物是秘密  h0 G, D! Z5 v7 ^
细胞计数仪计数

shuimochunlan

为防止细胞凝集，可以回输时用少量自体血浆或者白蛋白重悬细胞后再用生理盐水混匀，可提高细胞悬液稳定性. s4 U) H) s/ |0 }

lyj-0017

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+ L/ [+ K. i7 S) _7 H
: I( Y/ u8 \& @: k+ N是直接采集外周血吗？你说的每次回输100亿细胞，是指采集一次外周血，然后一次性回输100亿细胞？还是这100亿细胞分几次回输？你们这种方法培养两周最高能扩增出多少细胞，CD3CD56双阳细胞比例能到多少？