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楼主: rongrong12662
go

组织块贴壁法培养的msc几天才能长出来呢   [复制链接]

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发表于 2014-11-12 11:18 |只看该作者
回复 rongrong12662 的帖子9 h4 ~, s0 j5 P8 `

* }0 e4 ~1 O' O- V3 n- b脐带组织用贴壁法培养还是比较快的,不同操作流程和不同培养基培养的效果是不同的,主要是看前期贴壁的效果,一般贴壁效果好,换液时组织块不滑落,细胞很快就能长满。我们实验室培养7天组织周围就会出现少量贴壁细胞,第10天就差不多可以传了。建议组织种瓶的时候先不加培养基,把组织铺瓶后培养箱放置10-20min,然后向瓶底加入培养基,缓慢水平放置,注意培养基不要冲走组织。或者加培养基混匀组织后铺瓶,在培养箱中稍倾斜放置(在瓶口端下方放无菌纱布)10-20min,注意使组织都均匀贴在瓶底面,培养基在瓶底,最后拿走无菌纱布。
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发表于 2014-11-12 16:48 |只看该作者
回复 rongrong12662 的帖子
7 \6 m) j2 l! S8 V* h/ l2 m  c
* j1 E/ d6 n# X8 {3 N0 U  S快的话3天。一般情况5到6天就可以看到了。
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发表于 2014-11-13 09:04 |只看该作者
脐带存在个体差异,生长有慢有块,十天长出来也算正常,但是前期不要过度的去观察细胞,刚分离结束建议培养基少加点,T75的话8ml就行,一定要充分贴壁
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发表于 2014-11-13 15:34 |只看该作者
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应该是10-12天一般。可能一周的时候仔细找找就能找到个别的细胞了。  g% l! ?! x* t2 {: Z# R

2 `+ U5 E) Z9 V+ v各位老师贴块的时候75T的话加多少液呢? 5ml够么?
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发表于 2014-11-17 15:29 |只看该作者
一般是10~15天吧,前7天不要动。
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发表于 2014-11-25 11:11 |只看该作者
一般是2周左右,2周有时只是部分组织块有细胞“爬出”,要打算传p1代还的等几天呢,前几天不用晃动,可以进行半量补液
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