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楼主: rongrong12662
go

关于消化的问题   [复制链接]

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发表于 2014-11-26 14:38 |只看该作者
一般细胞长到80%就要传代了,不然出现接触抑制的现象,一来细胞会老化,二是消化的时候容易成团。
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发表于 2014-12-22 15:24 |只看该作者
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+ |6 R- x5 ^, l" R/ ~/ g
- q  G- @2 D) P; z; i" @3 N4 H我也遇到过你这种情况,分析原因可能就是细胞长得不均匀,细胞如果是在皿上单层生长且融合度达到80%,最好的消化状态是呈现一种流沙状,如果细胞长得不均匀出现细胞复层,消化的时候就会出现你这种情况,因为你只能消化道最上面一层细胞,而底层的细胞几乎就消化不到,最后是靠你机械的吹打才吹下来。细胞就会连成一片成絮状、丝状。下次传代后把细胞尽量吹成单细胞悬液,接种后轻轻晃动一下培养皿是细胞均匀的接种在培养皿中。希望能对你有所帮助
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发表于 2014-12-23 10:04 |只看该作者
传代前先用PBS对瓶内残留的培养基进行冲洗,培养基内的FBS或SR有终止消化的作用;再有胰酶的浓度,消化的时间,消化的温度,这些都是影响因素。
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