如何提高MSC复苏后活性状态？

Ernest

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5 e$ W4 y0 a; X, y/ F8 i/ Y
+ e2 m1 P; Q% ^& c* w复苏的原则是 速溶 ，温度你可以调至40摄氏度，考虑到冻存管的传热速度没那么快，另外，复苏后的细胞悬液最好用PBS离心洗涤两遍，去掉DMSO。种瓶后第二天最好再换一下液

Ernest

这都是只是建议，你可以试试

Ernest

请问你复苏是只用温水，而不用恒温水槽吗？

yuanyecat

回复 yahooyeah 的帖子5 j+ C3 \7 h% i) [1 R) G

" G  V, N1 u9 Z% W, {4 f你的冻存液成分是什么？我认为冻存质量的好坏首先关键在于冷冻保护剂，我们实验室一般常用DMSO，一般是以9份小牛血清或细胞培养液与1份的DMSO混合而成。也有实验室用无血清培养液（DMEM）50%+胎牛血清FBS 40%+DMSO 10%，过滤除菌。另外还加一些聚乙二醇、白蛋白以及羟乙基淀粉的保护剂。

cartoonyang

回复 yahooyeah 的帖子, q; ?/ @! C* ?) O% z/ p9 g

8 c- a! C: W  a+ R7 H% g按照你这样的复苏过程，应该没有问题啊？除非是细胞解冻后死的多，你可以尝试染色检测活率看看？

呵呵

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8 o( |3 Z( d0 Z; o  K8 J  w4 x% R9 i8 V8 x6 y- S2 c2 |& L0 ~
你加培养基离心时，培养基是否提前温好了？

yahooyeah

回复 Ernest 的帖子2 U. Y5 O' ~& a' A6 {' T" B, u5 X, i# t
3 R4 b% d  m1 l: ]7 r
是的，我没用恒温水槽啊，就用烧杯陈的40度左右的温水

yahooyeah

回复 yuanyecat 的帖子  {; s$ o, k) {. p! b; B
6 m% H1 J! M2 S6 ?% D: x* o( a# M
我是培养基：血清：DMSO=6:3:1配置的冻存液

yahooyeah

回复 cartoonyang 的帖子. s% ^7 r- X( \- u! O0 T+ C
6 i5 z8 N; `0 z
谢谢建议

yahooyeah

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4 ^. F4 V2 ]5 G; w( W( W我是提前放超净台了一段时间