间充质干细胞培养的问题

细胞海洋

回复 baicaikua 的帖子& J, a$ i( a) q2 o" `! i
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点击图片可以放大

单个核细胞

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7 J! A- R; f* e; Y4 x7 x& m( F* A0 _  T; G1 h" n/ \
两条建议：1、继续培养，正常传代冻存；2、注意传代冻存操作。

saier.HK

第一张看着是有杂细胞，第二张看起来挺好，继续培养多消化两次，杂细胞就没有了。千万别消化过度了，如果消化过度，这个细胞状态就会很差。消化条件要慢慢摸索。祝你好运！

yahooyeah

回复 WeiTing 的帖子4 Q; W, y6 N! ]. ?) _( b# j, V

/ h# M* p& Q, F5 K3 n纯度问题，我看你这里面MSC含量太低了，大多数是单核细胞之类的

suning5

正常。没有什么异常出现

hefan1234

看上去不像细胞老化，可能是提取种瓶的细胞不纯，也可能培养基的原因，普通培养的话这样没多大关系，如果要培养纯度较高间充质干细胞，可以试一试美国LONZA化学成份限定培养基，我们实验室用过之后效果挺不错，培养的间充质干细胞纯度较高，拍的照片也好看，就是终止消化比较麻烦。

yuanyecat

不一定是純度不足，還可能的原因是培養基，或者是血清，你用的是什麼培養基和血清或者血清替代物？

snowny007

能看到一些杂细胞和死细胞，是第几代的细胞，组织消化后的还是其他的，细胞图片倍数再扩大看看。如果是原代消化后的可能是杂细胞，多传代几次就好，如果是培养久的，那就是老化造成的了

WeiTing

回复 weijunning 的帖子0 }+ t$ \8 S# f1 B( q

/ r8 k3 h: ~" |$ ?来源 : 脐带4 U4 N! u' O! a4 W* [/ ~& _" Q
分离: 去除动、静脉后，全部组织都进行酵素水解(包含华通氏胶和脐带最外层- 羊膜之多层上皮)
# L' N0 ]0 i3 i血清 : 胎牛血清
, P3 ?# v7 ~  {! I* Z图一是初代分离培养，再传代。

weijunning

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- E& Z1 [1 }/ B. S" N0 s4 Z% l7 O4 Q$ Z* t# W7 R: a' z
操作应该没有什么问题，其实不用进行酵素水解，直接组织块培养也能出细胞，只不过时间长一些，一般3~5天出细胞；请问你培养基中添加什么细胞因子了？细胞因子对细胞的培养诱导是非常有利的，常规加的因子有FGF-β   EGF。请核对你所加的细胞因子。