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间充质干细胞传代时细胞成片脱落是怎么回事?   [复制链接]

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发表于 2015-9-17 17:27 |只看该作者
一种可能是细胞密度过高,另外一种原因可能是培养基的问题。
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发表于 2015-9-21 10:41 |只看该作者
我们培养的间充质也有几回成片脱落,正常培养,第二天看有一块区域就脱落了而且掉的特别干净,但别的地方细胞还好。不过传代后细胞状态也不行了。之后培养细胞就没事儿了。很诡异
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发表于 2015-9-30 11:39 |只看该作者
如果不是污染,那就要看看是不是细胞接种,未混匀,细胞密度不一。导致部分位置细胞密度过大,培养过程中提前脱落。
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发表于 2016-2-2 13:27 |只看该作者
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我也遇到过你说的这种现象,我自己总结,你用的是无血清的间充质干细胞专用培养基,细胞一般长得非常快,有时候60%汇合度的时候,想等第二天多一些再传代,但是第二天往往汇合度就以及是100%了,这个时候消化细胞,细胞就整片脱落,吹打不开。其实你不消化它,它也会整片脱落。就是细胞长过了,什么原理我也想知道。现在我都是控制90%以内传代。为了保证这个条件,自己摸索传代密度,传代时间可能要精确到小时上。多积累经验。
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发表于 2016-2-2 16:11 |只看该作者
细胞成片掉落说明细胞联系紧密,并非坏现象,传代时吹散即可,不影响细胞使用。
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发表于 2016-4-18 15:55 |只看该作者
回复 田甜 的帖子9 K0 l3 i7 _  ]" A; w+ |! ]
3 ?$ T+ T; K9 ^% ~5 k9 r4 O6 W
貌似隔天消化,90%左右很好消化,第三天密度大了就消化不下来
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发表于 2016-4-18 15:59 |只看该作者
回复 水念人倦 的帖子6 v& f  ~2 i6 G* I) x, n

- Z' @% J( t$ O$ l没有污染,40倍视野下没有看到菌,培养液也没有混浊变色的现象,废了很大劲消化的细胞,里面有很多未消化成单细胞的细胞团,流式检测,表型都正常
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发表于 2016-4-18 15:59 |只看该作者
回复 蜗牛爱贝贝 的帖子  X/ J5 h. o9 N  o4 r
* C, U* V7 G* X& {* l
没有污染,40倍视野下没有看到菌,培养液也没有混浊变色的现象,废了很大劲消化的细胞,里面有很多未消化成单细胞的细胞团,流式检测,表型都正常

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发表于 2016-8-19 15:11 |只看该作者
回复 309208770 的帖子7 D. Z6 _1 d, ~3 L. l

( @* ]( K* Z/ |8 A4 F, n. D* b你培养的间充质干细胞成片脱落的问题解决没呢?我的也是,成片脱落,很难消化成单个细胞,就算吹打了,也基本还是几个细胞黏在一起,不知道怎么办……
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小小研究员

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发表于 2016-8-22 16:34 |只看该作者
回复 xingyuncao 的帖子. d' E- p  R* n" G( v1 E
. @+ C* f% \1 n5 G
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