培养间充质干细胞培养基问题

woshibotao_01

低糖DMEM+10%的血清，额外可以加bFGF

wuhuaguo88l

a-MEM和GIBCO胎牛血清即可，细胞因子主要是VEGF、EGF、FGF、PDEG等，并一定都要加，可根据实验要求和目的不同，添加不同因子。

pcljsw2008

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/ A2 ~) Z8 W+ Y& {7 \# C$ {( D+ q请教下这几样因子的浓度可有相关参考，谢谢，我想自己配培养基用，但一直效果不理想

edwardellen

我们用的是DMEM/F12 混合培养基，都是商业化的，血清加进口的胎牛，基本都没有问题。7 s, w3 z1 E2 S( Y
如果是无血清培养，可以用BI的，但是成本比较高，500mL接近4000元，LONZA的UltraCULTURE也不错，好像还有证，可以医用的。; L2 F" Z* J2 V2 R4 w. `  g
一般都不用加什么细胞因子，因为间充质相对来说还是很好养的，有钱不怕费事的话，可以加一点bFGF，形态会比较好看。
& `/ a9 B" q0 a! ^' p9 [重要的是传代消化的时候，一定要注意消化酶的使用，不要刺激的太久，对细胞损伤大。

caustic

如果你一般实验的话 就用DEME/F12就可以了，如果是其他使用的 建议用GIbco的临床培养基。

playboy723

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3 j4 o. l' W6 q
请问下你用无血清培养基的时候MSC是悬浮生长还是贴壁生长的？我之前用DMEM/F12+knock out血清结果MSC不贴壁，我硬是悬浮培养了好多代，后来换成FBS后细胞才又贴壁生长。呵呵，挺逗的。

edwardellen

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1 a, ~1 z8 K4 m. s( l) d$ Y9 t' d9 H' U9 |% h& ~
贴壁的，我试过BI和stemcell的，胶原酶消化的原代不行，很难贴壁，但是组织贴壁或者传代以后的，都没啥问题。你这个悬浮生长的挺有意思的呀，没有见过，是脐带间充质么？

20062926

如果用于实验  就是F12加胎牛或小牛血清，再加点谷氨酰胺吧，如果是用于治疗就用GIBCO的DMEM吧，因子用血清替代品

playboy723

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# S" F5 b9 m7 P8 t' ?0 e
1 Y2 d1 y/ d( o4 ]+ m1 {" t恩，是脐带间充质，我的确是用胶原酶消化的，从这一点上可以看出knock out血清还是不如FBS，但我没用过你说的那两种培养基，你个人感觉他们和FBS相比效果如何？

edwardellen

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细胞不如血清培养基长得旺盛，但是传几代也不至于有什么大问题，做实验是可以的。