这是我养的脐血间充质干细胞，大神帮我看看

121qwq

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# D/ G* z! w5 P3 ~) c/ T. Z4 E
' Y& f! p0 g0 I等梭形的细胞增殖差不多了就消化下来传代即可

浪花

你好，我想做脐带血间充质干细胞的分离与纯化，您可以帮我一下吗？步骤是啥 啊，我看文献看来好久，也理不出个头绪

浪花

nihao

yongchens0

MSC需要通过传代贴壁培养，消化时间等进行纯化。可以参照国际细胞治疗协会（ISCT）对MSC的界定

ych123

回复 yongchens0 的帖子6 Q+ U" i- L; A4 }1 D( e1 N: U! Y" Y
: k' r/ a) @7 @
恩，好的，我在摸索摸索

ych123

回复 qiqishichaoren 的帖子6 f5 I2 ?" o/ S- D: u2 t( I- e

* c! f) c1 Q$ Z+ l  i6 g第一批提的细胞策底宣告失败了，前天传代消化过久了，那天加胰酶后半天细胞没见漂起来，形态也还是梭形，等了很长时间，后面消化过了，现在去看都没几个细胞了

qiqishichaoren

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: x+ s  Q. i2 I! x: B$ J" P
6 ?* p+ f/ Z# O4 k% N7 z/ q照理说不会这么严重吧，尤其是消化过程，原代消化有难度是有可能的，建议分两次消化，第一次消化收集细胞，第二次再消化，这样第一次消化下来的细胞就不会过头了。但是也不至于后期贴壁和生长这么差的，考虑有没有支原体污染或者其他污染。

qiqishichaoren

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' M1 `6 r) `! U5 `8 j2 z9 \; U9 b8 @" I9 j5 L* x3 z( D  F* E9 d8 _; J
还有就是你消化后种瓶后应该看一下细胞密度，是本来就少还是死掉了

ych123

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8 ?- j$ s2 m# ]; ~1 V
- [* ?( N( ~. V% Z0 H; Z; H5 p当时看了细胞密度的，细胞还是蛮多的，但是后来贴壁的很少，，不知道怎么回事