大家帮我看看这是脐带间充质干细胞吗

pcljsw2008

第一张是不是密度过高引起了凋亡或者成片装脱落啊

ych123

第一张是原代的，才10天呢；应该是比较密了

ganggangtry100

    是MSC，第一张是原代培养，细胞爬出来后没有及时处理，造成细胞融合度过高引起的，如果你把组织块剪的再碎一些，使之均有分布于器皿中，或者使用消化法消化脐带组织，收集单个细胞接种，就不会有类似现象发生了。0 a; c' ?  g, k6 i$ |" k8 y- c+ E- l
    就像第二章照片，细胞传代后，MSC能均匀贴壁，从而能正常生长，表现出梭形并且漩涡状生长的图片。
- }- f9 ?. S# Z5 _  A# |    现在的一些培养基培养脐带MSC，是很容易培养出来的，即便开始有一些贴壁的内皮、上皮或者平滑肌细胞，在胰酶传代几次后，MSC很容易富集出来。希望实验成功。/ t. `* m; d8 d

ych123

回复 ganggangtry100 的帖子$ c4 G- @. x' ?1 L( ~

0 C- d6 |) a/ J6 F- c0 F$ q3 t恩恩，谢谢你的意见，脐带的还是很容易爬出来的，几次都成功了，而且长的非常快，请问你有养脐血间充质干细胞的经验吗，我养了好久了，总是很多圆形细胞，当降低接种密度后细胞贴壁的又不好，也有圆形细胞，还有就是把培养基吸出来继续接种，还能有贴壁的细胞。

ganggangtry100

回复 ych123 的帖子
) C9 U5 `2 g* g" a
0 T: i4 X! D( ~! n( e" d  相比脐带、骨髓等 脐血MSC还是比较难培养的，在2000年之前，因为用同样的培养基，在脐血中难以分离培养出MSC，所以当时认定脐血中没有MSC。4 r* [4 w9 U. D( m  B
  我记得有一篇文章写的是脐血中分离出MSC的临界参数：要求脐血采集后保存时间必须小于15小时，分离得到的MNC必须大于1X108次方，如此条件他们才能得到63%的成功率。
6 r5 r3 z! t- d- I) p  我做过脐血MSC，成功率也不高，如果你在医院工作，有丰富新鲜的脐血来源，建议你可以做做，如果反之，尝试的意义不大。

ych123

回复 ganggangtry100 的帖子1 N8 @, ^% x# H9 Z/ Z

4 c# l7 B9 q- p! v4 h5 g, j$ w恩，现在我们采脐带血还是相对比较方便得吧，虽然有时候有点低声下气的感觉，到目前为止我大概分离了8分脐血，每次都有看到梭形细胞，有3份脐血的贴壁细胞较多，但里面混杂很多圆形细胞，1份传到P2就不能下传了，因为细胞越传越少 ，后面增殖缓慢，还有两份正在传。目前一份都还没养出来比较纯的细胞。

jifengtang

应该是FBS质量不好，导致细胞形态不好

ych123

回复 jifengtang 的帖子
: O& k+ B* y  O6 _$ z: `5 L1 R# {+ |5 _+ _3 n8 C; \8 x4 |2 i2 e
血清质量不好？血清对细胞形态影响这么大啊

jifengtang

回复 ych123 的帖子% t: R) o, i3 m6 f3 R# \5 o) H
+ D, h7 g" N. A) M  V& C
影响非常大，血清不好，P1就会出现严重老化现象，P0也会长的很慢甚至长不出来

ych123

回复 jifengtang 的帖子% W! B1 J) p' a
; D. I1 X$ `; h! x3 t1 A
这样啊，我们一个同事用的gibicol的血清，但是在p4的时候形态也不好，我的脐血每次P2增殖都很慢，不知道是不是血清的问题，我的脐血用这个血清增殖还是蛮快的，一般2天就传代了