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标题: EDTA-2对细胞培养有问题 [打印本页]

作者: 剡溪兰客 时间: 2017-4-21 14:48 标题: EDTA-2对细胞培养有问题

以前都是自己用肝素钠配的采血套装，现在换了家公司，用EDTA-K2，发现养细胞3天有点问题，是不是采血管有问题，大家帮忙讨论一下，什么情况

作者: wzs1985 时间: 2017-4-21 18:11

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不说说什么问题？

我们之前有试过采血管，也试过采血袋。而且抗凝剂也没有特意选择。暂时没有发现特别的地方。

作者: 剡溪兰客 时间: 2017-4-22 00:08

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前期非常好，马上就长不动了。你们用过edta-k2的？还是肝素采血管？

作者: 淘知路遥 时间: 2017-4-25 16:32

用的抗凝管是绿色头盖：肝素锂或者肝素钠。你来之前公司同事用EDTA-K2就没发现问题？

作者: 剡溪兰客 时间: 2017-4-26 08:35

回复淘知路遥的帖子5 f8 k$ z* c3 {# @

这个有点复杂，这个东西是以前还有一家公司留下来的，但是他们说可以养起来，不过他们自体血浆是在4天加的。

作者: 淘知路遥 时间: 2017-4-26 08:43

个人感觉接种当天或次日、4天加血浆对细胞增殖影响没有太大，看下采血管的保质期，多想想有没有其他存在疑点的地方

作者: 剡溪兰客 时间: 2017-4-26 10:41

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我查了很多资料说是EDTA会对增值产生影响，我的考虑是因为他们是4天加的，分裂象没什么问题，我是种瓶就加了，直接带入进去培养了

作者: 淘知路遥 时间: 2017-4-26 11:38

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EDTA抗凝管紫色头盖，乙二胺四乙酸(EDTA，分子量292)及其盐是一种氨基多羧基酸，可以有效地螯合血液标本中钙离子，螯合钙或将钙反应位点移去，阻滞和终止内源性或外源性凝过程，从而防止血液标本凝固。适用于一般血液学检验，不适用于凝血试验及血小板功能检查，亦不适用于钙离子，钾离子，钠离子，铁离子，碱性磷酸酶，肌酸激酶和亮氨酸氨基肽酶的测定及PCR试验。% I9 C7 A/ Q+ Q
难道是EDTA引起细胞缺钙了，要补钙不成

作者: 剡溪兰客 时间: 2017-4-26 11:58

回复淘知路遥的帖子0 t: Q, A7 Y4 h9 X* _0 m1 x

这是一方面哦，还有其他的原因

作者: 阿秀哥 时间: 2017-5-2 11:17

之前看过一篇文献，说的是几种不同的抗凝剂对血样的影响，其中肝素钠的效果最好，EDTA的效果最差。本人没试过，不知道是否真实，仅供参考。

作者: 免疫与细胞 时间: 2017-5-15 14:18

http://www.stemcell8.cn/thread-96042-1-2.html，看这个帖子

作者: 剡溪兰客 时间: 2017-5-15 14:30

回复免疫与细胞的帖子6 Q; K: ^- k& h/ t/ C1 g" L
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恩，研究过了。

作者: Ivan0108 时间: 2017-5-17 13:19

感觉你们还是培养体系有点问题。
1、BD的紫色EDTA 10ml采血管我们用过，细胞没出现过任何问题。
2、28ml柠檬酸钠采血带也用过，细胞也没问题。
3、绿色国产10ml肝素钠采血管用过，细胞任然没有问题。 m6 _: O6 j8 v! Z9 ], P' H! \' W
每样都试过上千次的，所以说还是你们体系有问题。试着去优化下培养体系，培养环境吧

作者: 剡溪兰客 时间: 2017-5-17 13:54

回复 Ivan0108 的帖子0 h1 C7 o4 E0 A1 P" G
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BD的管子有一定的影响，血浆的使用影响更大。其他没多大问题

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