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标题: 脐带间充质干细胞成团的原因 [打印本页]

作者: skyboy0523 时间: 2010-9-25 16:25 标题: 脐带间充质干细胞成团的原因

我培养的脐带间充质干细胞在经过酶解后，离心去除培养液，加生理盐水后混匀，再过滤，发现仍然有许多细胞团，请教高手分析下原因

作者: lchanlon 时间: 2010-9-25 16:45

是你消化的不好，利用0.25%的胰酶消化后，要用手轻轻的拍打几下，让细胞完全分开，再用吸反复吹打几次，我以前时候也有细胞团，后来发现就是没有消化好的原因。

作者: 清影 时间: 2010-11-5 13:59

请问楼上你们在做原代培养时怎么样解决酶消化时粘稠的问题的？

作者: xuehu20 时间: 2010-11-9 14:54

请问楼上你们在做原代培养时怎么样解决酶消化时粘稠的问题的？
- g2 _( I: [9 U& s9 s. ?清影发表于 2010-11-5 13:59

: Z2 s# t1 ^* b$ |- V

相同问题，请赐教

作者: 清影 时间: 2010-11-16 09:07

没有人帮忙么？呜~~最近我们自己也在摸索，用透明质酸酶会好一些么？

作者: 12846168 时间: 2010-11-16 09:39

做原代的时候不要消化。组织块贴壁法最好了。

作者: medliujuan 时间: 2010-11-16 09:58

做原代的时候首先要把组织的粘液尽量的刮干净，消化是时间要足够，吹打均匀，还有滤网也要检查

作者: 柏林小杨 时间: 2010-11-16 10:00

回复 6# 12846168 : ?" ] Z9 d- k8 c

组织块细胞迁出的时间太长了，想尽快收集到大量细胞

作者: 清影 时间: 2010-11-16 10:01

我们是用酶消化方法分离的，消化后很粘稠，细胞离心不下来，细胞收量很少，损失很大。怎么样解决粘稠的问题？谢谢楼上的同行们

作者: wuxiao101325 时间: 2010-11-16 11:47

回复 9# 清影 ! q! l5 Q( ?" z2 W& k1 Y2 q: t
粘稠不是问题，建议看看鄙贴http://www.stemcell8.cn/thread-18220-1-1.html以及deron同学的问题及鄙人回复

作者: 清影 时间: 2010-12-13 10:37

楼主，组织消化是单酶吧。用胶原酶消化后在用胰酶消化一遍，可以分散细胞

作者: xuehu20 时间: 2010-12-15 10:11

回复 medliujuan 的帖子. ^# o ^3 g/ x; G7 X0 a
1 }' U' J. ?0 y: I& A
请问，我们做的酶消化法通过滤网后进行培养，发现视野中是清晰了，但是细胞好像也没几个了，您也出现过这种状况吗

作者: 清影 时间: 2010-12-20 16:17

回复 xuehu20 的帖子- b# e$ k# }- [! \9 g5 ]
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你的消化液很粘稠吧？是不是离心把细胞都倒掉了呀？

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