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标题: 正在培养内皮祖细胞的来讨论吧，呵呵 [打印本页]

作者: liucz001 时间: 2011-11-13 16:53 标题: 正在培养内皮祖细胞的来讨论吧，呵呵

本帖最后由细胞海洋于 2011-11-13 23:20 编辑

最近正在培养内皮祖细胞，本论坛人气不足啊，，希望斑竹多多支持，谢谢了，培养内皮祖细胞真的好难啊。

作者: haiq1984 时间: 2011-11-13 20:01

把方法拿出来讨论嘛！！8 f/ Z1 f$ w( O0 \1 `
比如来源呀，培养基的选择，培养方式的选择等等

作者: yyshpy 时间: 2011-11-14 17:57

我培养过血管内皮细胞，还好吧，没有那么难啊，普通培养基，原代的话注意防止污染就行了

作者: yyshpy 时间: 2011-11-14 17:57

内皮细胞的形态很漂亮，胖胖的铺路石啊

作者: 细胞-77 时间: 2011-11-14 18:15

你养的是什么内皮啊？我们实验室养角膜内皮，内皮就一层细胞，得出经验了也不是很难的。你的实验方法是什么呢？遇到的困难是什么呢？

作者: yyshpy 时间: 2011-11-15 20:32

血管内皮，注意取材的时候防止污染，原代消化的时候把握尺度，不能太过，传代的时候根据属性摸索密度，我传的密度比较低，内皮细胞生长挺快的

作者: ronain 时间: 2011-11-16 17:33

本帖最后由 ronain 于 2011-11-16 17:38 编辑 ; D! j8 G9 L0 D' Y( s
! d) `' \$ n/ z" V5 ~# }3 W6 C
大鼠骨髓来源，密度梯度离心单个核细胞，EGM-2MV培养基，48h后取贴壁细胞继续培养。但是细胞集落出现的不多，长得很慢，而且集落形态不一，有梭形卵圆形，但还有很多像成纤维细胞。是不是分离液用的不对呀，需要把细胞提纯才能长得快吗?

作者: zz091115 时间: 2011-11-21 23:22

回复 ronain 的帖子/ p7 [' b6 x p: n) M

EPC不好搞的确我也碰到过你的情况传上几代会好点但是还是不能做到很纯除非你用FACS或是MACS去分选但是那样得率不高最后细胞数量少 EPC又是密度依赖型的

作者: youndie 时间: 2011-11-22 09:39

我做脐血来源EPC，EGM-2MV培养基，我的细胞克隆出现时间通常是2-3W以后，可是看许多文章（特别是中文文章）说是3-5天就出现了，对于这点很是不解。3-5天我也养出来过克隆，可是此类克隆明显不是EPC的形态，到是和MSC形态相似，且增殖能力有限。不知道在这里做脐血来源EPC同行怎么看这个问题？

作者: 细胞海洋 时间: 2011-11-22 10:45

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作者: henryjia 时间: 2012-3-2 05:37

youndie 发表于 2011-11-22 09:39 9 [( w) c: ?/ i3 Q
我做脐血来源EPC，EGM-2MV培养基，我的细胞克隆出现时间通常是2-3W以后，可是看许多文章（特别是中文文章） ...

同意。我的也是。但是EPC一代形成细胞克隆，生长很快，而且我最高传到8袋（弟子），呵呵，还是很稳定。

作者: violet_sc 时间: 2012-5-23 18:21

回复 henryjia 的帖子8 m. R" ^. n! e' D& u+ @
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你好我刚开始养EPC 按照中英文文章都试过可是都没有成功啊现在这个是前几天增殖明显现在都不生长了能和你交流交流向你请教下吗？

作者: 细胞海洋 时间: 2012-5-24 10:58

回复 violet_sc 的帖子$ \0 r4 u3 B9 T2 K* N4 K
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作者: violet_sc 时间: 2012-5-24 18:46

回复细胞海洋的帖子

好的，谢谢。求分析内皮祖细胞分离培养失败的原因
http://www.stemcell8.cn/thread-56376-1-1.html
这是我的实验步骤，能告诉我你的步骤吗？

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