组蛋白western可以直接用总蛋白来做吗？

markllq

请教各位，我在网上看到做组蛋白western的方法都是先提取组蛋白再做western。这种方法步骤有点复杂，我以前直接拿总蛋白做过，也能抗出来。请问能不能这样做？为什么一定要提组蛋白？欢迎有经验的同胞指点，谢谢~~

天枰2012

个人认为应该可以直接提总蛋白来做，用的抗体有特异性的嘛

刘志红

回复 markllq 的帖子2 G9 G6 p- x- {+ Y( |/ Z
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个人认为虽然weston特异性好，可是最终还是依靠蛋白质互作来实现的，细胞内那么多的蛋白质，而组蛋白存在于细胞核内，可能会造成干扰吧。

若兰汀

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, T- m3 p! X! `3 r6 @8 X抽取核蛋白来做，买一个核蛋白抽提试剂盒一小时内抽提完成，5×106个细胞足够（约一个T25长满就行），我用一个T25的细胞抽提得到的蛋白做了四个指标（含内参），效果很好。