询问大家关于细胞消化的问题

小小龙001

回复 zxd962735279 的帖子
  p/ L9 u  k$ d$ M/ z
; Q, N3 [5 R+ s1 n+ I" V用的175的瓶子，种瓶密度大概在1×10的6次方左右

小小龙001

回复 zxd962735279 的帖子6 z& x! z* l7 D  W9 b2 U
; Q5 ?$ B# x( E) s
用的175的瓶子，种瓶密度大概在1×10的6次方左右

小小龙001

回复 yeshch 的帖子. l; I/ n$ ^7 M$ D, ?4 \8 D! n
4 ~, M* E" e% b4 }0 I# a  O
之前就是这样消化的，一点问题没有，这是第一次出现这种情况

小小龙001

回复 2013sp 的帖子
6 U( ~9 G* i. {, Q
, b8 r# Q" z( W4 e4倍镜下看大概融合率在85左右，而且细胞形态挺正常的，是不是胰酶的问题？

woshibotao_01

絮状物，很可能是你细胞长的太密了，脱落的死细胞，凝结成的，不容易吹散。

angel-niu

1.请问楼主的胰酶含不含EDTA？如果胰酶含有EDTA，消化能力会很强，加上细胞密度过大，很可能会形成团块，里面还好含有一些细胞间胶原，所以很难吹打开。
/ o$ x! Q: ^5 N5 X1 U' G2.楼主多长时间换液，细胞状态如何？用PBS冲洗了没，在换液前？如果长时间不换液，会出现此种情况，细胞代谢物加上污染可能。

小精卫

是不是没分离干净

zxd962735279

楼上说i的有道理，还有一点就是细胞密度很大，细胞过后很容易聚团

yeshch

有可能是消化过了，DNA等从细胞溢出导致粘连，此时越吹越粘，建议消化时间短一些看看

2013sp

是不是你的细胞密度太大，已经分化了，形成了团块？MSC是比较容易被消化的，可以用0.25%的胰酶，放在37℃培养箱一分钟，然后拿出来在显微镜下观察。MSC很容易消化过，要注意观察。
6 X, x) P: z# A5 u/ a. Q9 ~( h