ips诱导形态变化

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本人诱导人血管内皮细胞，加入慢病毒后3天后发现细胞形态由圆变长，细胞状况也不太好，想问一问，是不是病毒量加多会影响细胞形态

宋红卫song

病毒太多会影响细胞状态。一般做病毒的侵染之前要测一下病毒的感染复数。不测也可以，但需要做一个对照，比如带GFP的病毒，病毒侵染之后至少要使相当一部分的细胞带上GFP，证明你的病毒量是可以的。除了病毒量，被侵染之前细胞的生长状态很重要，细胞尽可能处于旺盛生长期。

宋红卫song

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' A' A' r. W, o3 D2 I侵染之后细胞状态差也不一定就不能诱导ips，再继续观察观察。但是ips过程中，病毒侵染3-4天后细胞会发生MET过程，即会有一些细胞聚集生长，即“一小堆、一小堆”地长，慢慢会形成克隆

宋红卫song

侵染之后细胞状态差也不一定就不能诱导ips，再继续观察观察。但是ips过程中，病毒侵染3-4天后细胞会发生MET过程，即会有一些细胞聚集生长，即“一小堆、一小堆”地长，慢慢会形成克隆

2374691002

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谢谢啊，我同时在诱导人的成纤维细胞，加的同样的病毒量，成纤维细胞在转染4天后观察看到细胞由长变圆了，细胞形态正常。

快乐小泡

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9 Y; s8 u, Z% E  u
8 ^. A0 w$ |5 [6 Y请问你的诱导人的成纤维细胞病毒上清有没有测滴度呢？我也在诱导人的ips，成纤维细胞感染后感觉细胞状态都不好了，也没有变圆或者聚集生长

innatestem

iPS诱导过程中之前的病毒包装很重要，又能够有足够的病毒量。建议你进行病毒滴度的测定，有专门进行滴定的试剂盒。或者你可以做一个感染的量的梯度。此外，polybrene的加入量也很重要，polybrene的终浓度一般在2---12ug/ml，浓度太大也会影响细胞的状态。祝好！