求脐带血CIK细胞培养答疑

只因偶然

本人近期培养的脐带血cik细胞出现了一点问题，在第8天之前，脐血cik细胞长速还可以，细胞密度有3左右，细胞形态正常，可是第8天转培养袋之后，cik细胞就不怎么长了，密度渐渐降低，在1.0左右，而且细胞还抱团或者成絮状。无菌检测，内毒素支原体检测都无异常。培养箱co2浓度 、温度、培养基、细胞袋批号都没变。求大神帮找原因。

wuhuaguo88l

出现细胞絮状，有可能是细胞死亡，一方面，回忆一下是不是操作过大，造成细胞的死亡；另一方面检测一下细胞活率，是不是出现细胞死亡的现象。

老姜

培养瓶中的细胞一般不添液不易打开瓶盖进行吹打等处理，一则这样会增加污染的概率，二则CIK细胞团增殖团不紧凑，磕磕瓶壁将大团敲散就够了。“拍打关照”目的就是后者，因细胞增殖团大，团中央的细胞则吸收各类养分有限，死亡的概率就高。

阳光正暖

看用途了吧

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小沙弥敲木鱼

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那就是摸索中的经验了

只因偶然

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我做过实验，即使不转袋，继续增加培养瓶来培养，也长不起来，就是说培养到中后期增值速度下降了。据说是培养基的问题，新培养基没到，暂时没做实验验证

只因偶然

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看导师或者公司，不同的导师或公司可能在血浆的添加上会有点区别

小沙弥敲木鱼

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血浆不是天然的营养么，为什么在脐带培养就不用加了？

小沙弥敲木鱼

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: p# s6 e& W' f; E( P培养袋中的培养可以轻轻晃晃，那培养瓶中的用移液管吹打是不是一个效果?还有这个“拍打关照”主要是对于细胞的哪方面的刺激？谢谢