求脐带血CIK细胞培养答疑

只因偶然

本人近期培养的脐带血cik细胞出现了一点问题，在第8天之前，脐血cik细胞长速还可以，细胞密度有3左右，细胞形态正常，可是第8天转培养袋之后，cik细胞就不怎么长了，密度渐渐降低，在1.0左右，而且细胞还抱团或者成絮状。无菌检测，内毒素支原体检测都无异常。培养箱co2浓度 、温度、培养基、细胞袋批号都没变。求大神帮找原因。

1233hyp

请问第八天以前，培养的容器体积是多少？会不会密度太大，抑制生长了？可以参考一下：http://www.stemcell8.cn/thread-69130-13-1.html

why77yhw

是否进行过细胞活率检测？根据你描述的现象判断，活率应该较低。不知道你用的什么培养基，该培养基能否承受细胞密度在3左右呢？！密度过高，营养会不足！还有，是否排除是真菌污染？无菌检测的方法是否足够灵敏，菌量低的情况下也有可能检测不出来。

老姜

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; c  Z2 n  e/ F% u据经验：首先，细胞培养袋的质量很重要: W5 F% M# Y4 H5 `0 x  Z7 D
              其次，刚一转袋后添液量要少，使细胞处在相对高的浓度下，并且，每天要轻轻摇动培养袋，使聚团的细胞分散。
. k* w- f- i; g" W( ~3 Y1 t, U        一般情况下，细胞在培养袋中扩增的不如培养瓶中快，因此，每天的“关照”更为重要

fjq729587158

可能是密度问题，密度保持在1×10E6个/mL

momoenn

细胞抱团，有絮状，这样的情况下你计数是不准确的。你可以再观察两天，看看情况会不会改善。从培养瓶到培养袋，因为环境的改变、细胞浓度的改变，细胞会有一个适应期。

只因偶然

回复 1233hyp 的帖子  K7 C  B' J  X$ r
9 F7 l: \6 _" J" q
以前细胞密度也差不多 转袋后培养速度都正常

只因偶然

回复 why77yhw 的帖子3 S: T8 _4 ?" k: V2 I

/ L2 n, p1 h) S, U: k- `; p细菌真菌支原体抗酸染色革兰氏染色都没问题，以前也是这密度，培养都正常，就这段时间后期就慢了

只因偶然

回复 老姜 的帖子2 s/ X2 z) Q/ |) p& ^# A

$ `* |! V# C; \. V# K/ B7 U每天上班都会轻晃拍散

只因偶然

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: @" Y7 [! h1 d+ U+ a' ?1 I% s以前密度也差不多都没问题，就近期转袋后变慢