求教做卵巢颗粒细胞的大神

thinktank

大家好，小弟想做小鼠卵巢颗粒细胞，最近试着分了一次原代细胞，发现跟文献报道的不一样，论坛有大神做这个吗，想学习下，谢谢。

moluxingke

& R9 `* g) q. c* |

- l* `6 W% t$ B2 q1 Z7 h# j颗粒细胞那么小，做IF的话，即使放大很多倍也看不很清楚吧？你确认你做出来的结果是FSHR和细胞核染料共定位吗？另外你的抗体是否好用？比如组织切片上，FSHR是不是明显的在颗粒细胞膜上？

细胞海洋

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" d% J( F! K, B8 m/ j! n( P! n# J. N  A3 W7 i
和级别无关

thinktank

回复 细胞海洋 的帖子# M0 }3 q- n5 K. q

8 n5 s) J! ^* W* e) a4 s* O( F可能我的级别不够，所以之前试过穿不上去

细胞海洋

回复 thinktank 的帖子0 W6 }$ v# D1 O2 Z2 u" W. g
" a1 y( j+ g9 F* |& `6 U$ }) v+ g1 k
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thinktank

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* o1 e* B" W, ^/ j) z. G+ T
3 J  B1 a0 ]; x6 p2 F. L  h) d我又重新做了一遍，发现如果是跨膜蛋白的话不能用TRITEN透膜，不透膜的话结果就是膜蛋白，谢谢你回答我，可能是因为我的级别你不够，反正照片传不上去啊。

mrhighly

, P2 t! V+ s. N# g* L6 y( d2 V  J- \1 p/ p) ]
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( n! \" u  f1 ?5 K, I& O
: E* T7 _3 M9 k有图片吗?这个膜蛋白我没有染过，文献里说的是跨膜蛋白的话，考虑是不是抗体的问题啊？或者你用高倍镜仔细看看，是不是高背景，或者是大部分分布在膜内胞浆？

thinktank

回复 mrhighly 的帖子6 v$ P" H* m9 s) r; a0 T5 l

  B" R8 b9 M0 T, V# Q5 b您好，请教您个问题，我做颗粒细胞免疫，抗体是FHSR，但是发现都是核内表达的，我看文献里说应该是跨膜蛋白，所以有点困惑了，能否帮我解答，谢谢。

thinktank

回复 mrhighly 的帖子, @3 \) W9 O1 `2 L6 H) q

3 O% E6 C4 C* M( }4 E5 Y, S9 @好的，看来您是做这个的，以后有不懂得还得多向您请教啊，谢谢。

mrhighly

回复 thinktank 的帖子" U* J0 k; H0 k2 l: o+ W+ ?
# ~5 G/ U) Z$ [+ n2 ]4 g7 [
颗粒细胞难道不应该是颗粒状的吗？6 B! N; R/ m. P( H
应该就是不是太成梭型的颗粒状，你不放心可以收了看看基因表达。foxl2是granulosa的maker。