定量实验影响CP值的因素？

gxbzjznn

大家好，我最近在做定量试验，发现每次定量出来的CP值波动性很大，希望各位前辈和各位同仁一起讨论一下影响定量实验的一些因素，并提出解决方案。谢谢！！！

leizhao1229

个人觉得最关键的是加样要准确，建议：
" U, E4 L8 V7 l, ]. m: i. L. E6 g& o. t至少做3个平行孔，看数据的时候可以去掉一个离群值再取均值；* D3 |+ l: \* `. ]0 I( W: ]
能混合的先在一个管子里充分混合后再分别加到每个孔中；& o, f7 ~' o! W7 L$ W8 w# k/ t
祝顺利！

leizhao1229

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* ]' k8 h! s8 W( @7 T' x, R& t6 \* _) O2 H5 _5 l
个人觉得最关键的是加样要准确，建议：! C+ w% b5 n% @( Z7 e
至少做3个平行孔，看数据的时候可以去掉一个离群值再取均值；/ z( F, t6 U. u4 K, ]6 D4 m  @
能混合的先在一个管子里充分混合后再分别加到每个孔中；7 O; ?" E# C9 j6 L# L  p6 j
祝顺利！

gxbzjznn

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% E: K& S  r, v% D6 G2 K, [. i/ y! h4 \- l$ h
感激不尽！我们是点的三个重复孔，三个值减去内参的平均值来计算的！

gxbzjznn

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- r4 L9 U7 l' B8 @% m( y: n' }; E) j7 y$ B. c) |9 h. ^# d( h- [
你们是用单内参还是双内参？

leizhao1229

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/ _" ]3 Q/ e3 f9 {" l
/ C& M! e: K' h" ^2 C; n3 e单内参

gxbzjznn

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4 |) d$ J5 _* L7 N$ _8 G) L
2 g' I9 N$ j+ {单内参可以说明问题吗？我做的双内参，但是出现一些回避不了的问题

jddakui

三个因素 1 、扩增效率  模板量和模板质量  梯度稀释  2  、 至少3重复     3、 内参   多个内参或者更换内参

leizhao1229

回复 gxbzjznn 的帖子) A7 ~# M" K7 D! x% K5 F9 _

( e* \; S' ]; \' c; U9 z- B如果内参稳定的话，单内参也可以吧，当然，双内参更严谨一些，什么避免不了的问题呢？拿出来大家讨论一下呗，我也学习学习哈

gxbzjznn

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/ }7 @3 M* m, ^$ [+ O: P
0 [# I. d8 o1 ~" C6 F! f# B你们做的基因表达量升高的最大的倍数有多少？