求教为什么阴性对照会出条带，不像是引物二聚体呢，而且所有样本都用一样的ddH2O，如

未来之星

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支原体检测结果，从左向右依次是：Marker、阴性对照、样本1、样本2、样本3、样本4、样本5、样本6、样本7、样本8、样本9
& l$ \# ?3 ^2 ?PCR反应体系：ddH2O：6ul  
3 z+ s! c. z& ?% k& o+ H                        Mix：   10ul1 p5 f' A) U" i
                        培养基：2ul
( w/ ]- l: m% U# ~                        F引物： 1ul+ Y: p* s- B0 f
                        R引物： 1ul
4 C7 N" |$ s3 \! M  p, F% c2 zPCR反应程序：94℃ 3min2 o7 E2 g4 n8 a
                        94℃ 20s（35循环）
/ R% a+ D/ o# O. B5 Q5 X/ h1 D              66℃ 20s（35循环）
. [" a6 X2 a/ k: D- |& e              72℃ 60s（35循环）9 f. U4 b. G. ]# ?& `; L/ X+ s* v
              72℃ 5min7 y# A! B8 a4 e9 q
为什么阴性对照会出条带，不像是引物二聚体呢，而且所有样本都用一样的ddH2O，如果水有问题，样本1-5也应该会有条带啊，谁能帮我分析一下，谢谢了！" X! e6 d  K( ^" ~

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yeshch

你的marker是多大的？我们设计支原体引物PCR出来就200-300bp，你的好像都偏高啊？为什么没有positive ctrl？会不会是加样出了问题，建议重新跑一遍带上PC

未来之星

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: w( ~5 ]5 ~2 t3 K. z+ |) @* e! b! e+ d1 |- l/ Q
marker是3000的，因为没有阳性样本，所以没设。