外周血细胞分离效果不好

小沙弥敲木鱼

外周血放置在四度冰箱4小时左右采取分离细胞，步骤都按正常的走，可是分离的白膜层和上清液分解线不清晰，没有之前的立即做的效果好，碰到这种情况怎么处理？？？？谢谢

小沙弥敲木鱼

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1 O, b% Y$ ^) f7 F% n9 \$ E8 _$ c% K4 L8 A
谢谢，还有血液和Ficol 我是按2：1分离的，还有你说的细节我没太注意。

小刘

外周血常温可以放置8小时左右，如果超过8小时再放4度冰箱，一般影像不是很大，至于分离不清楚，你就要从以下几个方面入手：1.操作方式，加分离液时是否捅破分离液液面；2.血液有没有按1:1稀释，有没有混匀；3.使用的是一台离心机吗，参数是否有问题；4.离心的时间是否按要求操作，时间短的话也会出现分离不清晰；5.拿出时有没有晃动，是不是已经离心好你没拿稳导致不清晰。排除以上干扰，你的问题就解决了。

veda327

回复 大少爷 的帖子$ D! V; v2 a. e/ c
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这样子说的话，血站里面买来的血液也是可以分离的咯？

312473313

把血液样本和Ficoll都静置到常温再分，问题还是把血放在了冰箱

veda327

血样和ficoll都要平衡到室温在进行下一步的操作，采样和后续操作尽量安排好，争取做到采样之后立即进行分离！

yingjie

很可能是你的Ficoll分离液的问题，Ficoll最好是常温避光保存，血液冰箱放4小时影响也不会很大，我们这里有放过夜的，一样分析效果很好。你最好是开瓶新的分离液，把已经分离出来的除血液层外，再用Ficoll分离一次。注意升降速。

saliai2016

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# z2 N  l) b& e1 h
# g4 V4 N- E4 Y6 d学习了，我们采血以后放置5个小时放冰箱，原来效果没有不放冰箱好

小沙弥敲木鱼

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" y; r5 s& }3 W9 F" k) k# J% f4 K! y3 r7 A' r
好的  谢谢  以后注意这个问题

stella2015

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  ?5 p! K, u+ Y" z+ i: ~( O  ?. f) [. p, ^' ?" T# z
当然是可以用，短时间内不会有太大差异，说的不是最好么？~~
( O, B1 ]( F- x  g! R长时间在4度储存的话，最好避光~~